丙型肝炎病毒檢測(cè)在丙型肝炎病毒感染診斷、分類及管理中起著重要作用。

　　丙型肝炎呈全球性流行，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全球HCV的感染率約為2.8%，估計(jì)約1.85億人感染HCV，每年因HCV感染導(dǎo)致的死亡病例約35萬例。由于HCV感染具有隱匿性，多數(shù)感染者并不知道感染HCV。

　　HCV屬于黃病毒科肝炎病毒屬，其基因組為單股正鏈RNA，基因組含有一個(gè)開放閱讀框（ORF），編碼10余種結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)（NS）蛋白（NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B），NS3/4A、NS5A和NS5B是目前直接抗病毒（DAA）的主要靶位。HCV基因易變異，目前可至少分為6個(gè)基因型及多個(gè)亞型，按照國(guó)際通行的方法，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示HCV基因型，以小寫的英文字母表示基因亞型（如1a、2b、3c等）。

　　丙型肝炎病毒（HCV）感染是急性和慢性肝病的常見病因，通常臨床癥狀不明顯。然而，慢性丙型肝炎可導(dǎo)致肝硬化、終末期肝病和肝細(xì)胞癌（HCC）。丙型肝炎病毒檢測(cè)在丙型肝炎病毒感染診斷、分類及管理中起著重要作用。

　　HCV感染檢測(cè)方法

　　下列檢測(cè)方法可用于診斷和管理丙型肝炎（HCV）感染：

　　血清學(xué)檢測(cè)：檢測(cè)血清或血漿中的丙型肝炎病毒特異性抗體(抗-HCV)，報(bào)告陽(yáng)性或陰性結(jié)果。

　　血清學(xué)檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV)，用于篩查與診斷丙型肝炎病毒感染，結(jié)果報(bào)告為抗-HCV陽(yáng)性或陰性。不同的臨床應(yīng)用檢測(cè)方法，如化學(xué)發(fā)光免疫分析法CIA，或者酶免疫法EIA等檢測(cè)方法均可用于HCV感染者的篩查，均具有較高的特異性與敏感性?？焖僭\斷測(cè)試（RDTs）可以被用來初步篩查抗-HCV。

　　陰性檢測(cè)不足以排除慢性HCV感染。一些血液透析和自身免疫性疾病患者可能出現(xiàn)抗-HCV假陽(yáng)性結(jié)果，免疫功能缺陷或合并HIV感染者可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果，急性丙型肝炎患者可因?yàn)榭?HCV檢測(cè)處于窗口期出現(xiàn)抗-HCV陰性。

　　分子檢測(cè)：檢測(cè)病毒核酸（HCVRNA），分為定性檢測(cè)或定量檢測(cè)。病毒載量的數(shù)量單位為IU/mL。

　　對(duì)于抗體陽(yáng)性者，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行HCVRNA檢測(cè)，以確定是否為丙型肝炎患者。血清抗-HCV滴度越高，HCVRNA檢出的可能性越大。HCVRNA分子檢測(cè)包括：定性檢測(cè)或定量檢測(cè)。

　　定性試驗(yàn)用于檢測(cè)是否存在HCVRNA(特異性約為98%)。定量檢測(cè)用于檢測(cè)具體的病毒載量(特異性約為98-99%)，應(yīng)當(dāng)采用基于PCR擴(kuò)增、靈敏度和精確度高并且檢測(cè)范圍廣的方法，其檢測(cè)結(jié)果采用IU/ml表示。HCVRNA定量檢測(cè)適用于HCV現(xiàn)癥感染的確認(rèn)、抗病毒治療前基線病毒載量分析、以及抗病毒治療過程中及治療結(jié)束后的應(yīng)答評(píng)估。

　　上述兩種類型的檢測(cè)均可用于識(shí)別急性或慢性HCV感染。急性HCV感染暴露2周內(nèi)，可在血清中檢測(cè)到HCVRNA。另一方面，可能需要大約8-12周才會(huì)出現(xiàn)抗-HCV陽(yáng)性結(jié)果。然而，急性感染的病毒清除期，可出現(xiàn)HCVRNA檢測(cè)不到、抗-HCV陽(yáng)性結(jié)果，即導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果；這也可能發(fā)生于HCV感染恢復(fù)與HCV感染后的自發(fā)緩解。

　　HCV基因分型：在流行病學(xué)研究中作用重大，臨床上用于預(yù)測(cè)應(yīng)答的可能性和治療持續(xù)時(shí)間；基因型測(cè)定幫助臨床醫(yī)生將病毒分為6主要基因型。

　　HCVRNA基因分型的方法有分子生物學(xué)和血清學(xué)兩大類，前者包括DNA測(cè)序法、型特異性引物擴(kuò)增法、基因芯片、探針雜交等，后者是合成HCV特異性多肽來檢測(cè)其特異性的抗體從而區(qū)分基因型，但不能區(qū)分亞型。國(guó)內(nèi)外在抗病毒療效考核研究中，應(yīng)用Simmonds1～6型分型法最為廣泛。HCVRNA基因分型結(jié)果有助于判定治療的難易程度及制定抗病毒治療的個(gè)體化方案。

　　血樣收集

　　使用血清分離膠管或血清分離采血器收集3.5ml血液?；颊卟恍枰厥鉁?zhǔn)備。血液樣本應(yīng)進(jìn)行離心和冷藏或冷凍，以便于運(yùn)輸和穩(wěn)定。

　　成年人接受HCVRNA聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)，應(yīng)使用EDTA管收集4-6ml血液。嬰兒使用兒童EDTA管收集2ml血液。收集血液后，血樣必須立即送往實(shí)驗(yàn)室處理。實(shí)驗(yàn)室人員于室溫下在6小時(shí)內(nèi)采用離心法將血漿從全血分離。

　　針對(duì)HCV基因分型，使用EDTA管收集6ml患者的血液樣本。血漿必須在4小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分離和冷凍；為了方便運(yùn)輸與穩(wěn)定，血液必須進(jìn)行離心及冷凍。

　　美國(guó)肝病研究協(xié)會(huì)（AASLD）建議對(duì)高危人群進(jìn)行篩查，高危人群包括靜脈注射毒品者、接受過血液成分輸血或器官移植的個(gè)體、不明原因的氨基轉(zhuǎn)移酶水平（AST/ALT）升高個(gè)體、血液透析患者、丙型肝炎病毒感染母親、艾滋病毒感染者、針頭刺傷或暴露于HCV陽(yáng)性血液的保健和其他工作人員以及目前有HCV感染性伴侶的個(gè)體。