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梅毒檢測(cè)中容易犯的13個(gè)錯(cuò)誤 需注意

2019-08-05 來源:檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)基地  標(biāo)簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護(hù)膚
摘要:在梅毒診療中RPR(當(dāng)然還有其他非特異性抗體檢測(cè)方法,本實(shí)驗(yàn)室采用的是RPR,故以此為例)是具有重要價(jià)值的。因此實(shí)驗(yàn)室提供準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果尤為重要。

RPR又稱為快速血漿反映素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)。人體在感染了梅毒螺旋體后,梅毒螺旋體自身以及機(jī)體內(nèi)被損害的細(xì)胞可以釋放出類脂質(zhì)物質(zhì),這些類脂質(zhì)物質(zhì)引發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗脂質(zhì)抗體,人工合成的心磷脂、卵磷脂和膽固醇混合抗原可以與抗脂質(zhì)抗體發(fā)生肉眼可見的凝集反應(yīng),而且凝集反應(yīng)的強(qiáng)度還與機(jī)體內(nèi)的抗脂質(zhì)水平成正比。

在梅毒診療中RPR(當(dāng)然還有其他非特異性抗體檢測(cè)方法,本實(shí)驗(yàn)室采用的是RPR,故以此為例)是具有重要價(jià)值的。因此實(shí)驗(yàn)室提供準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果尤為重要。那些RPR操作過程中可能導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤的環(huán)節(jié),你是否還傻傻的分不清呢?

01.RPR可以檢測(cè)腦脊液標(biāo)本么?

不可以。

RPR雖然是改良版的VDRL,但是如果要檢測(cè)腦脊液中的梅毒螺旋體非特異性抗體則不能使用RPR試劑,應(yīng)該是用VDRL-腦脊液檢測(cè)試劑。如果誤用RPR試劑檢測(cè)了腦脊液樣本,無論結(jié)果陰性還是陽性,都不能采用。

02.血清和血漿,RPR可以檢測(cè)么?

不可以。

單獨(dú)就檢測(cè)而言RPR既可以檢測(cè)血清中的梅毒螺旋體非特異性抗體也可以檢測(cè)血漿中的梅毒螺旋體非特異性抗體。但是對(duì)于梅毒患者而言,RPR檢測(cè)往往需要?jiǎng)討B(tài)監(jiān)測(cè)其結(jié)果的變化,而血漿檢測(cè)結(jié)果又明顯高于血清檢測(cè)結(jié)果,如果前后兩次采用了不同類型樣本,則容易導(dǎo)致前后結(jié)果無法比較。這也是提醒檢驗(yàn)工作者在發(fā)局RPR報(bào)告時(shí),應(yīng)該仔細(xì)核對(duì)樣本類型,當(dāng)前后兩次RPR檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)矛盾時(shí),樣本類型也是要考慮的因素之一。

03.乳糜血可用以RPR檢測(cè)么?

不可以。

乳糜血的處理有很多方法,我們實(shí)驗(yàn)室采用的是高速離心分離法,乳糜血經(jīng)高速離心后,吸取下層清亮部分用于RPR檢測(cè)。

04.2-8度保存的血清直接用以RPR檢測(cè)?

不可以。

RPR實(shí)驗(yàn)對(duì)溫度要求還是很嚴(yán)格的,無論是試劑,還是樣本,甚至于實(shí)驗(yàn)環(huán)境都應(yīng)該是在18-29度的室溫下。溫度過低(比如冰箱冷存的血樣沒有室溫放置30分鐘而直接加樣進(jìn)行RPR檢測(cè))會(huì)怎樣呢?當(dāng)然是可能造成結(jié)果假陽性。

05.RPR試劑搖勻即可用于實(shí)驗(yàn)?

RPR抗原試劑混勻是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。因此推薦在滴加抗原前首先水平旋轉(zhuǎn)混勻,然后用滴針輕輕地反復(fù)吹吸混勻。

06.充分混勻后就可以直接滴加抗原了?

用滴針滴加抗原時(shí),第一滴要棄去不用,從第二滴開始加。滴加抗原時(shí),不是用力擠出的,是把滴針垂直憑借自由落體運(yùn)動(dòng)方式滴加的,否則會(huì)倒是抗原滴加過量。

07.能用移液器滴加抗原么?

不推薦。

很多人習(xí)慣ELISA的操作后液誤以為RPR試劑的一滴抗原液應(yīng)該是50ul左右,其實(shí)不然,RPR試劑盒中,滴針垂直向下以自由落體運(yùn)動(dòng)方式滴加的一滴抗原只有約17ul。

08.用移液頭在反應(yīng)圈涂勻血清時(shí)要注意什么?

傾斜移液頭避免尖端劃破反應(yīng)圈上的防水層。

09.能用蒸餾水稀釋血清么?

不能。

應(yīng)該用無菌生理鹽水作為稀釋液。

10.滴加抗原后能用振蕩器么?

不能。

應(yīng)該用水平旋轉(zhuǎn)儀,100r/m,8分鐘。振蕩器一般速度較快,對(duì)凝集反應(yīng)存在干擾,較快的震蕩速度容易導(dǎo)致抗原抗體復(fù)合物解離而造成假陰性,而且容易使液體震蕩到反應(yīng)圈外。

11.8分鐘后要不要立即判定結(jié)果?

應(yīng)該立即判定結(jié)果。RPR實(shí)驗(yàn)與TPPA不同,TPPA在3小時(shí)后結(jié)果是穩(wěn)定的,可以次日判定結(jié)果,但是RPR檢測(cè)結(jié)果應(yīng)該在旋轉(zhuǎn)結(jié)束后3分鐘以內(nèi)判讀。否則液容易產(chǎn)生假陽性。

12.判定結(jié)果時(shí),可否借助顯微鏡觀察凝集?

不可以。

雖然RPR是改良版的VDRL,但是RPR因?yàn)樘砑恿撕谏碱w粒,其檢測(cè)結(jié)果只能是強(qiáng)光下的肉眼判讀。不能顯微鏡下觀察。

13.實(shí)驗(yàn)完成后,反應(yīng)板放入試劑盒一同收入冰箱冷存?

不可以。

在開封后,RPR試劑是需要冷存的,但是反應(yīng)板應(yīng)該放在干燥干凈的地方保存。 

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