α2-纖溶酶抑制抗原概述
α2纖溶酶抑制物主要由肝臟合成,一種單鏈糖蛋白,是體內(nèi)特異的抑制活性的絲氨酸蛋白酶,有限時(shí)性抑制纖溶酶的作用和抑制纖溶酶原與纖維蛋白結(jié)合,防止纖維蛋白被抗纖溶酶水解的作用。 高血脂 、 肥胖癥 、口服避孕藥、 冠心病 、 心肌梗死 、動(dòng)脈 血栓形成 、缺血性 中風(fēng) 等t-PA含量減低。
α2-纖溶酶抑制抗原正常值
1~12ng/ml。
α2-纖溶酶抑制抗原臨床意義
(1)t-PA含量隨年齡、劇烈運(yùn)動(dòng)和應(yīng)激反應(yīng)而增高,靜脈滯留導(dǎo)致t-PA含量增加。
(2)先天性t-PA含量增高癥。
(3)高血脂、肥胖癥、口服避孕藥、冠心病、心肌梗死、動(dòng)脈血栓形成、缺血性中風(fēng)等t-PA含量減低。
α2-纖溶酶抑制抗原檢查方法
(1)用0.05mol/L碳酸鹽緩沖液稀釋t-PA抗體。
(2)用稀釋緩沖液稀釋抗體-POD結(jié)合物。
(3)用基質(zhì)緩沖液溶解鄰苯二胺(8mg/ml),并加入10μl 30% H2O2。
(4)將t-PA標(biāo)準(zhǔn)倍比稀釋成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125IU/ml。
(5)標(biāo)本稀釋:1份檸檬酸鈉抗凝血漿加5份稀釋液。如果估計(jì)t-PA值增高,血漿作1∶10稀釋。
(6)用稀釋之t-PA抗體包被ELISA反應(yīng)板,每孔200μl,溫育過夜,然后用洗滌液洗3次。
(7)加標(biāo)準(zhǔn)/標(biāo)本200μl,溫育1h后,同上洗滌3次。
(8)加過氧化物酶抗體復(fù)合物200μl,溫育1h后,同上洗滌3次,洗后立即加基質(zhì)。
(9)每孔加基質(zhì)200μl,顯色10~15min。
(10)加硫酸(3mol/L)50μl或鹽酸(1mol/L)100μl,10min中止反應(yīng),于492nm,2h內(nèi)比色,以稀釋緩沖液為本底。
(11)據(jù)吸光度讀數(shù)由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得t-PA含量。
α2-纖溶酶抑制抗原注意事項(xiàng)
ELISA法是一項(xiàng)特異性和敏感性較高的免疫學(xué)試驗(yàn)。