血清乳酸脫氫酶(LDH)概述
乳酸脫氫酶是體內(nèi)能量代謝過程中的一個(gè)重要的酶。此酶幾乎存在于所有組織中,以肝、腎、心肌、骨骼肌、胰腺和肺中為最多。這些組織中的LDH的活力比血清中高得多。所以當(dāng)少量組織壞死時(shí),該酶即釋放血而使其他血液中的活力升高。測定此酶常用于對(duì)心梗、肝病和某些惡性腫瘤的輔助診斷。
血清乳酸脫氫酶(LDH)正常值
1、酶速率法(37℃)218~458U/L;
2、比色法225~540U/L;
3、乳酸法(37℃)LDH-L109~245U/L;
4、丙酮酸法(37℃)LDH-P240~460U/L。
血清乳酸脫氫酶(LDH)臨床意義
1、乳酸脫氫酶活性增高可作為診斷心肌梗塞的一個(gè)有用指標(biāo)。心肌梗塞發(fā)生后12-48小時(shí),LDH開始升高,2-4天達(dá)到高峰,8-9天恢復(fù)正常。
2、肝炎、肺梗塞、惡性腫瘤等也可使LDH升高。腫瘤轉(zhuǎn)移所致的胸腹水中LDH往往也升高。
3、降低見于X線照射。
血清乳酸脫氫酶(LDH)檢查方法
靜脈采血后立即送檢,檢測方法:
1、比色法:
混勻,室溫放置5min后,在440nm波長,比色杯光徑1.0cm,蒸餾水調(diào)零點(diǎn),讀取各管吸光度,以AU-AC之差值查標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出LDH活力單位。
2、連續(xù)監(jiān)測法:
各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)本室生化自動(dòng)儀型號(hào)及說明書操作。主要參數(shù)為340nm波長,37℃,吸樣量500μl,連續(xù)監(jiān)測時(shí)間60s,標(biāo)本與試劑體積之比為1∶50。
血清乳酸脫氫酶(LDH)注意事項(xiàng)
1、比色法:
①乳酸鉀、乳酸鈉也可作為LDH底物,但因其為水溶液,含量不夠準(zhǔn)確,且保存不當(dāng)易產(chǎn)生酮酸類物質(zhì),抑制酶促反應(yīng)。而乳酸鋰為固體,穩(wěn)定,易于稱量。
②除二乙醇胺緩沖液外,也可用Tris或焦磷酸緩沖液,避免了原金氏法中甘氨酸緩沖液對(duì)LDH的抑制作用,提高了陽性檢出率。
③比色應(yīng)在5~15min內(nèi)完成,否則吸光度降低。
④結(jié)果>2500U時(shí),可用生理鹽水稀釋標(biāo)本后再測,其結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
2、連續(xù)監(jiān)測法:
①標(biāo)本勿溶血,當(dāng)溶血達(dá)Hb 0.8g/L時(shí),LDH活性可升高58%。
②標(biāo)本于室溫(25℃)保存,2天內(nèi)酶活性穩(wěn)定,冰箱保存酶活性降低,-20℃過夜LDH3、LDH4則全部失活。
③用血清或肝素抗凝血漿測定結(jié)果滿意,草酸鹽可抑制LDH活性。
④復(fù)溶后溶液變濁或初始吸光度>0.5應(yīng)棄去。
⑤利用正逆雙向反應(yīng)均可測定乳酸脫氫酶活性,但因反應(yīng)溫度、底物和緩沖液濃度不同,其參考區(qū)間也有差異。以乳酸和NAD為底物,在340nm監(jiān)測吸光度增高速率為正向反應(yīng),以LD-L表示;以丙酮酸和NADH為底物,監(jiān)測340nm吸光度下降速率為逆向反應(yīng),以LD-P表示。正逆反應(yīng)兩法相比,LD-L法的主要優(yōu)點(diǎn)是:A.正向反應(yīng)底物液的穩(wěn)定性比逆向反應(yīng)的穩(wěn)定性大,前者冰箱可保存6個(gè)月以上,而后者僅幾天;B.速率反應(yīng)的線性范圍(吸光度對(duì)監(jiān)測時(shí)間t作圖)較寬;C.重復(fù)性比LD-P好。由于逆向反應(yīng)速度比正向反應(yīng)速度快,其參考值約為LD-L的2倍。