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補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)概述
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(complement fixation test,CFT)是用免疫溶血機(jī)制做指示系統(tǒng),來檢測(cè)另一反應(yīng)系統(tǒng)抗原或抗體的試驗(yàn)。早在1906年Wasermann就將其應(yīng)用于梅毒的診斷,即著名的華氏反應(yīng)。這一傳統(tǒng)的試驗(yàn)經(jīng)不斷改進(jìn),除了用于傳染病診斷和流行病學(xué)調(diào)查以外,在一些自身抗體、腫瘤相關(guān)以原以及HLA的檢測(cè)和分析中也有應(yīng)用。
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)正常值
正常值 0~1∶10。
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)臨床意義
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可應(yīng)用在以下幾方面:①傳染病診斷。病原性抗原及相應(yīng)抗體的檢測(cè)。②其他抗原的檢測(cè)。例如腫瘤相關(guān)抗原、血跡中的蛋白質(zhì)鑒定、HLA分型等。③自身抗體檢測(cè)。 >1∶10為陽(yáng)性,診斷布氏桿菌病符合率為97.96%。
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)檢查方法
血素的滴定:
①取補(bǔ)體1ml,加BBS 9ml,依次稀釋成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同時(shí)取50%的溶血素0.2ml,加BBS 9.8ml,即為1∶100的溶血素,然后繼續(xù)稀釋成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。
②采取方陣排列試管,縱行各管加不同濃度的補(bǔ)體0.1ml,橫排各管加溶血素0.1ml(皆應(yīng)從最高稀釋度加起)混勻后,各管加BBS 0.2ml,補(bǔ)體和溶血素對(duì)照管各加BBS 0.3ml,最后在各管中加2%羊紅細(xì)胞0.1ml。各管總量為0.5ml,搖勻,放37℃水箱中30min,觀察結(jié)果。
以小量法測(cè)定抗體的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)為例。按表14-6逐步加入各種試劑,溫育后先觀察各類對(duì)照管,應(yīng)與預(yù)期的結(jié)果吻合。陰性、陽(yáng)性對(duì)照管中應(yīng)分別為明確的溶血與不溶血;抗體或抗原對(duì)照管、待檢血清對(duì)照管、陽(yáng)性和陰性對(duì)照的對(duì)照管都應(yīng)完全溶血。綿羊紅細(xì)胞對(duì)照管不應(yīng)出現(xiàn)自發(fā)性溶血。補(bǔ)體對(duì)照管應(yīng)呈現(xiàn)2U為全溶,1U為全溶略帶有少許紅細(xì)胞,0.5U應(yīng)不溶。如0.5U補(bǔ)體對(duì)照出現(xiàn)全溶表明補(bǔ)體用量過多;如2U對(duì)照管不出現(xiàn)溶血,說明補(bǔ)體用量不夠,對(duì)結(jié)果都有影響,應(yīng)重復(fù)進(jìn)行試驗(yàn)。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果,受檢血清不溶血為陽(yáng)性,溶血為陰性。
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)注意事項(xiàng)
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)參與反應(yīng)的成分多,影響因素復(fù)雜,操作步驟繁鎖并且要求十分嚴(yán)格,稍有疏忽便會(huì)得出不正確的結(jié)果,所以在多種測(cè)定中已被其他更易被接受的方法所取代。