T4淋巴細(xì)胞亞群概述

T淋巴細(xì)胞表面有多種抗原，其中簇分化(CD)抗原分類甚多，這些抗原除了標(biāo)記細(xì)胞的種類和分化階段外，同時(shí)也有一定的功能，或作為受體、黏附分子、信號(hào)傳遞成分等，可通過(guò)這些表面特征性抗原鑒別亞群。目前開(kāi)展較多的是用抗分化抗原的單克隆抗體，如抗CD4單克隆抗體，對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)出現(xiàn)陽(yáng)性率，判定亞群分布。T淋巴細(xì)胞亞群是觀察機(jī)體細(xì)胞免疫水平的重要方法，對(duì)惡性腫瘤、自身免疫性疾病、免疫缺乏癥、血液系統(tǒng)疾病的診斷、治療及預(yù)后判斷有重要價(jià)值。T細(xì)胞亞群之間有相互制約和相互輔助的作用，任何一方的增多或減少皆影響另一亞群的形成失調(diào)。

• 檢查部位 其他
• 科室 體檢、保健科
• 相關(guān)疾病 獲得性免疫缺陷綜合征
• 相關(guān)癥狀

T4淋巴細(xì)胞亞群正常值

• 55%～65%。

T4淋巴細(xì)胞亞群臨床意義

• (1)降低：低丙種球蛋白血癥、細(xì)菌感染、某些病毒感染。
  (2)升高：急性移植物抗宿主病(GVH)、肉瘤、硬皮病、皮膚黏膜淋巴結(jié)綜合征。

T4淋巴細(xì)胞亞群檢查方法

• （1）直接免疫熒光法
  ①取肝素抗凝外周血，用淋巴細(xì)胞分層液獲得單個(gè)核細(xì)胞，Hank液配成（1～2）×106細(xì)胞/ml。
  ②取1ml細(xì)胞懸液加入5ml塑料管中，離心2000r/min，2min，棄上清。
  ③加FITC-CD4 20μl，對(duì)照管加mIgG-FITC，4℃反應(yīng)30min。
  ④Hank液洗2次，2000r/min，2min。
  ⑤流式細(xì)胞計(jì)分析。
  （2）間接免疫熒光法
  ①分離PBMC，調(diào)至（1～2）×106細(xì)胞/ml。
  ②取1ml細(xì)胞懸液于5ml塑料管中，離心2000r/min，2min，棄上清。
  ③加抗CD4單克隆抗體100μl，對(duì)照管加抗體稀釋液或正常小鼠IgG，4℃反應(yīng)30min。
  ④Hank液洗2次，離心2000r/min，2min，棄上清。
  ⑤加50μl FITC-IgG，4℃反應(yīng)30min。
  ⑥Hank液洗2次，2000r/min，2min。
  ⑦滴片，熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞計(jì)分析。 

T4淋巴細(xì)胞亞群注意事項(xiàng)

• 同B細(xì)胞檢測(cè)。另外，由于間接免疫熒光技術(shù)所用的羊或兔抗鼠熒光抗體與部分白細(xì)胞表面發(fā)生非特異結(jié)合，以及Fc受體的非特異細(xì)胞反應(yīng)和多克隆熒光抗體的結(jié)合放大效應(yīng)，從而造成非特異陽(yáng)性熒光細(xì)胞增多。而對(duì)FITC直標(biāo)單克隆抗體來(lái)說(shuō)，抗體成分、性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上完全均一，只要不使蛋白質(zhì)-FITC復(fù)合物上帶上過(guò)多的電荷，就不會(huì)產(chǎn)生非特異吸附。目前國(guó)外基本上是用直接免疫熒光法，流式細(xì)胞計(jì)來(lái)分析T細(xì)胞亞群的，由于該儀器價(jià)格昂貴，國(guó)內(nèi)尚未普及應(yīng)用。因而對(duì)一般臨床實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，用免疫熒光顯微鏡也能開(kāi)展這項(xiàng)工作