PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)概述

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)是T淋巴細(xì)胞與有絲分裂原在體外共同培養(yǎng)時(shí)，受到后者的刺激可發(fā)生形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)的變化，部分小淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為不成熟的母細(xì)胞，并進(jìn)行有絲分裂的試驗(yàn)方法。

• 檢查部位 其他
• 科室 腫瘤科
• 相關(guān)疾病 小兒藥物性腎損害 小兒紫斑濕疹綜合征
• 相關(guān)癥狀 麻風(fēng)恐怖

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)正常值

• 計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞200個(gè)，識別淋巴母細(xì)胞(超過正常淋巴細(xì)胞2～4倍，核膜清晰，核染質(zhì)疏松而成細(xì)網(wǎng)狀，核仁明顯，胞漿豐富，呈嗜堿性)、過渡型淋巴細(xì)胞(體積變化不大，僅為上述明顯核變化)、小淋巴細(xì)胞(體積稍大于紅細(xì)胞，核染質(zhì)致密，無核仁)，統(tǒng)計(jì)其轉(zhuǎn)化率。皮膚科轉(zhuǎn)化率正常值大于58%。 

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)臨床意義

• PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率下降，是細(xì)胞免疫功能降低的反應(yīng)。此項(xiàng)檢查，皮膚科多用于疾病分型(如麻風(fēng))、病情判斷(如皮膚惡性腫瘤)、藥物療效觀察，以及某些免疫缺陷性和變態(tài)反應(yīng)性皮膚病的研究。
  異常結(jié)果
  免疫功能降低引發(fā)的各種癥狀。
  需要檢查的人群疑似麻風(fēng)、皮膚惡性腫瘤癥狀的病人。 

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)檢查方法

• 操作方法：
  1.取無菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml細(xì)胞培養(yǎng)液中，同時(shí)加入1 000μg/m1 PHA 0.1m1，對照管不加PHA，將細(xì)胞置37℃、5%CO2培養(yǎng)3d，每天搖動1次。
  2.培養(yǎng)結(jié)束時(shí)吸棄大部分上清液，加入8.5g/L NH4Cl 4ml混勻，置37℃水浴10min。
  3.2500r/min離心10min，棄上清液，沉淀加5ml固定液，室溫作用5min。
  4.2500r/min離心10min，棄上清液，留0.2ml沉淀細(xì)胞制片，迅速吹干。
  5.吉姆薩染液染色 10～20min，水洗，干燥。
  6.油鏡計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞中轉(zhuǎn)化的細(xì)胞數(shù)，計(jì)算轉(zhuǎn)化率。
  結(jié)果判斷：
  1.淋巴母細(xì)胞的形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞核的大小、核與胞漿的比例、胞漿染色性及核的構(gòu)造與核仁的有無。
  ⑴成熟的小淋巴細(xì)胞：與未經(jīng)培養(yǎng)的小淋巴細(xì)胞大小一樣，為6～8μm，核染色致密，無核仁，核與胞漿比例大，胞漿染色為輕度嗜堿性。
  ⑵過渡型淋巴細(xì)胞：比小淋巴細(xì)胞大，約10～20μm，核染色致密，但出現(xiàn)核仁，此為與成熟小淋巴細(xì)胞鑒別要點(diǎn)。
  ⑶淋巴母細(xì)胞：細(xì)胞體積增大，約20～30μm，形態(tài)不整齊，常有小突出，核變大，核質(zhì)染色疏松，有核仁1～2個(gè)，胞漿變寬，常出現(xiàn)胞漿空泡。
  ⑷其它細(xì)胞：如中性粒細(xì)胞在培養(yǎng)72h后，絕大部分衰變或死亡呈碎片。
  2.淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的計(jì)算 按上述分類檢查推片頭、體、尾三部分，計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞，算出百分率。轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞包括淋巴母細(xì)胞和過渡型淋巴細(xì)胞，未轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞指的是成熟的小淋巴細(xì)胞。在正常情況下，PHA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率為60～80%，如為50～60%則偏低，50%以下則為降低。
  再根據(jù)結(jié)果得出正確的判斷。 

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)注意事項(xiàng)

• 1.培養(yǎng)基成分對轉(zhuǎn)化率影響較大，注意其有效期。
  2.小牛血清用前需滅活。
  3.培養(yǎng)時(shí)要保證有足夠的氣體，一般10ml培養(yǎng)瓶內(nèi)液體總量不要超過2ml。
  4.PHA劑量過大對細(xì)胞有毒性，太小不足以刺激淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，試驗(yàn)前應(yīng)先測定PHA轉(zhuǎn)化反應(yīng)劑量。
  5.實(shí)驗(yàn)中要嚴(yán)格無菌操作，防止污染。
  檢查前禁忌：注意健康的飲食，保持良好的心情。
  檢查時(shí)要求：積極配合醫(yī)生。