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精子凝集試驗(yàn)概述
精子凝集試驗(yàn)從最初由 Kibrik等(1952年)創(chuàng)立的白明膠內(nèi)精子凝集試驗(yàn)開(kāi)始連同其后的發(fā)展,一共有4種
①明膠凝集試驗(yàn)(Kibrik,1952);
②試管玻片凝集試驗(yàn)(Franklin,Dukes,1964);
③毛細(xì)管凝集試驗(yàn)(Shulman,Hekman,Pann,1971);
④淺盤(pán)凝集試驗(yàn)(Friberg,1974)。
精子凝集試驗(yàn)正常值
精子在明膠內(nèi)均勻分散,若以黑紙作背面對(duì)光觀察,呈均勻乳白色,不見(jiàn)凝集塊為陰性。
精子凝集試驗(yàn)臨床意義
異常結(jié)果精子成小凝集塊,對(duì)光觀察可見(jiàn)小凝集塊有如雪花紛飛狀可診斷為精子凝集癥。需要檢查的人群精子凝集癥的不育患者。
精子凝集試驗(yàn)檢查方法
明膠凝集試驗(yàn)(gelatin agglutination test,GAT)
【準(zhǔn)備】
(1)配制 Baker液(Bakersolution);
葡萄糖3.00gNa2HPO4·7H2O0.46g;
NaCl0.20gKH2PO40.01g;
加雙蒸水至100mL。
(2)用 Baker液配制10%白明膠溶液,并置37℃水浴中備用。
(3)精子懸浮液:取正常新鮮精液(精子密度為80×106/mL 左右,活動(dòng)率>60% ,a、b兩級(jí)活動(dòng)精子 >70% ),室溫液化,用 Baker液稀釋至40×106/mL,置37℃水浴中保存?zhèn)溆谩?br />
(4)待檢血清及對(duì)照血清處理,均經(jīng)56℃水浴加熱30min,以滅活補(bǔ)體。隨后用Baker液,將兩種血清均作1∶4~1∶32倍數(shù)稀釋,存放于37℃水浴中備用。
【方法】
(1)取一定量的精子懸浮液,加入等量的10%明膠溶液,充分混合后,取0.3mL分別加入裝有0.3mL對(duì)倍稀釋血清的各支小試管內(nèi),并使其充分混合。
(2)將混合液分別用毛細(xì)吸管移置另一小試管(3mm ×30mm)內(nèi),37℃ 孵育2h,移置4℃放置5min,待明膠凝固后,觀察明膠內(nèi)精子凝集情況,并判斷結(jié)果。
【判斷】
(1)陰性:精子在明膠內(nèi)均勻分散,若以黑紙作背面對(duì)光觀察,呈均勻乳白色,不見(jiàn)凝集塊。
(2)陽(yáng)性:精子成小凝集塊,對(duì)光觀察可見(jiàn)小凝集塊有如雪花紛飛狀,不難鑒別。
(3)抗體效價(jià):以陽(yáng)性反應(yīng)的最高血清稀釋倍數(shù)為血清凝集抗體效價(jià)。
精子凝集試驗(yàn)注意事項(xiàng)
檢查前禁忌:
1、留精液前,病人應(yīng)停止性交4~7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、苯乙酸睪丸酮、苯丙酸諾龍。檢查前1個(gè)月內(nèi)應(yīng)停止飲酒,這點(diǎn)必須做到。
2、采取精液時(shí),可用軟皂或石蠟油做陰莖按摩,將標(biāo)本收集在無(wú)菌的試管中;也可用避孕套(沖洗干凈,不含殺精子藥物)或采用性交中斷法收集精液,但這樣收集的量往往不多。
3、如用上述方法采不到精液,可經(jīng)直腸內(nèi)按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿,檢查沉渣中有無(wú)精子。
4、不要將精液暴露在過(guò)熱和過(guò)冷的環(huán)境中。及時(shí)交給醫(yī)生備查,不得超過(guò)30分鐘。冷天要注意保暖,送檢時(shí)可放在內(nèi)衣口袋里保溫。
5、如果要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),應(yīng)先沖洗、消毒尿道口,再將精液收集在無(wú)菌試管中。
檢查時(shí)要求:積極配合醫(yī)生工作。