催產(chǎn)素概述
縮宮素(Oxytocin,OT)是由下丘腦室旁核,少量從視上核合成、分泌并貯存在垂體后葉的9肽激素。其與ADH僅在第3位和第8位上的氨基酸不同。其生理作用是促進子宮,乳腺肌上皮細(xì)胞及精曲小管平滑肌收縮。此外能促進黃體退化,具有利鈉作用,以及促進精子從陰道向輸卵管方面運輸。
催產(chǎn)素正常值
成人2.0pg/ml;
孕婦(17.4±4.8)pg/ml;
妊娠7~14周OT波動范圍為1~27pg/ml;
羊水足月時275pg/ml;分娩時695pg/ml。
催產(chǎn)素臨床意義
OT增高見于先兆流產(chǎn),妊娠高血壓綜合征。
催產(chǎn)素檢查方法
本法分三個步驟,即抗原與抗體反應(yīng)、B和F分離和放射性測定。
(1)抗原與抗體反應(yīng):將標(biāo)本(非標(biāo)記抗原)、標(biāo)記抗原和抗血清順序定量加入小試管內(nèi),置室溫(15~30℃)作用24h,使其充分競爭結(jié)合。
(2)B、F分離:分離技術(shù)多種多樣,常用沉淀法。
①第二抗體沉淀法:又稱雙抗體法,在受檢抗原與第一抗體特異性反應(yīng)后加入相應(yīng)的第二抗體,使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復(fù)合物共沉,一經(jīng)離心即可使結(jié)合標(biāo)記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀,分離完全,非特異性結(jié)合力低。但第二抗體用量較大,成本較高。此外血清濃度、抗凝劑的有無因素可在一定程度上影響結(jié)果。
②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白質(zhì)處于等電點狀態(tài),水化層破壞而導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。本法優(yōu)點是PEG制備方便、價廉、分離快速,缺點是非特異沉淀物較多,分離不完全。
③第二抗體-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀優(yōu)點,且保持第二抗體特異性沉淀的作用,又減少第二抗體用量,并降低PEG濃度,使非特異沉淀物減少。
④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖,使它表面具有一定孔徑的網(wǎng)眼,從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子復(fù)合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應(yīng)后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游離抗原吸附在活性炭顆粒上,離心使顆粒沉淀,上清液中含有結(jié)合的標(biāo)記抗原。
(3)放射性強度測定:B和F分離后,即可測定其放射性強度。測量儀器有兩類:液體閃爍計數(shù)儀(測β射線)和晶體閃爍計數(shù)儀(測γ射線)。計數(shù)單位是探測器輸出的電脈沖數(shù),單位為cpm(脈沖數(shù)/min)。
每次測定均需作一標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,以標(biāo)準(zhǔn)抗原的不同濃度為橫坐標(biāo),以測到的相應(yīng)放射性強度為縱坐標(biāo)作圖。放射性強度可任選B或F,亦可采用計算值B/B+F、B/F或B/B0。標(biāo)本應(yīng)作雙份測定,取其平均值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的受檢抗原濃度。
催產(chǎn)素注意事項
文獻(xiàn)報道,急性與慢性病毒性肝炎OT也升高。