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腦脊液的顯微鏡檢查

腦脊液的顯微鏡檢查概述

腦脊液顯微鏡檢查是通過對腦脊液細(xì)胞計數(shù)和分類計數(shù),從而為判斷各種疾病提供依據(jù)。 

腦脊液的顯微鏡檢查正常值

  • 正常人腦脊液中有少量的白細(xì)胞,無紅細(xì)胞。細(xì)胞數(shù)為:成人:(0-8)×106/L兒童:(0-15)×106/L  腦脊液中細(xì)胞多為大單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,兩者之比約為3:7,偶見內(nèi)皮細(xì)胞。 

腦脊液的顯微鏡檢查臨床意義

  • 異常結(jié)果:  (1) 腦脊液細(xì)胞數(shù)可增多,其增多的程度及細(xì)胞的種類與病變的性質(zhì)有關(guān)??赡苁侵袠猩窠?jīng)系統(tǒng)病變。  (2) 腦脊液細(xì)胞數(shù)可中度增多,常以淋巴細(xì)胞為主,為中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染、結(jié)核性或霉菌性腦膜炎。  (3) 腦脊液細(xì)胞數(shù)顯著增加,以中性粒細(xì)胞為主,為細(xì)菌感染時如化膿性腦膜炎。  (4) 腦寄生蟲病時,可見較多的嗜酸性粒細(xì)胞。  (5) 腦室或蛛網(wǎng)膜下腔出血時,腦脊液內(nèi)可見多數(shù)紅細(xì)胞。  (6) 有時可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細(xì)胞,為紅斑狼瘡病。  (7) 化膿性腦膜炎經(jīng)過有效的抗生素治療后,細(xì)胞總數(shù)迅速下降;結(jié)核性腦膜炎患者在早期以中性分葉核細(xì)胞為主,以后則淋巴細(xì)胞較多;腦血管意外病人腦脊液中的紅細(xì)胞數(shù)目減少,結(jié)合臨床,預(yù)示著出血既將停止或已經(jīng)停止。  需要檢查人群:中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病,腦血管病,腦寄生蟲病,中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。 

腦脊液的顯微鏡檢查檢查方法

  • 主要分五項(xiàng)檢查:
    一、 細(xì)胞總數(shù)
    1、直接計數(shù)法適用于腦脊液標(biāo)本比較清亮或微混。用滴管吸取已混勻的腦脊液標(biāo)本少許,直接滴入細(xì)胞計數(shù)板,充入計數(shù)池內(nèi),靜置2~3分鐘,低倍鏡下計數(shù)兩個池內(nèi)的四角和中央大格共10個大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù),即為1μl腦脊液中的細(xì)胞總數(shù)(紅、白細(xì)胞總數(shù))。在書寫報告時,再換算成每升腦脊液中的細(xì)胞總數(shù)。
    2、稀釋計數(shù)法適用于如果腦脊液的細(xì)胞過多、混濁或帶血的腦脊液。可用血紅蛋白毛細(xì)吸管吸取混勻的腦脊液20μl,加入有紅細(xì)胞稀釋液0.38μl的小試管中,混勻后滴入計數(shù)池內(nèi),用低倍鏡計數(shù)4個大方格的細(xì)胞總數(shù),乘以50,即為每微升腦脊液的細(xì)胞總數(shù),最后換算成每升腦脊液的細(xì)胞總數(shù)報告。
    二、白細(xì)胞計數(shù)
    1、直接計數(shù):非血性標(biāo)本,用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管壁僅附著少許冰乙酸,然后用同一吸管吸取少量混勻的腦脊液標(biāo)本,數(shù)分鐘后紅細(xì)胞就會完全溶解,再滴入計數(shù)池內(nèi),按上法計數(shù)。
    2、稀釋計數(shù) :如白細(xì)胞過多,可用白細(xì)胞稀釋液稀釋后,按上法計數(shù),注意計數(shù)結(jié)果應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
    3、血性標(biāo)本的校正計數(shù): 混有血液的腦脊液標(biāo)本混勻后,用1%的冰乙酸溶液稀釋后仍按上法計數(shù)。為了剔除因出血而帶來的白細(xì)胞,可用下式進(jìn)行校正。每微升CSF內(nèi)白細(xì)胞校正數(shù)=每微升CSF未校正的白細(xì)胞數(shù)-
    三、白細(xì)胞分類計數(shù)
    1、直接分類法:在白細(xì)胞直接計數(shù)后,轉(zhuǎn)高倍鏡觀察,依據(jù)細(xì)胞形狀和細(xì)胞核的形態(tài)進(jìn)行分類,共計數(shù)白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞100個,分別計算單個核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞所占的比例,以百分?jǐn)?shù)表示。如白細(xì)胞總數(shù)不足100個,則直接寫出單個核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的具體數(shù)字。如白細(xì)胞總數(shù)在30以下,可不做直接分類計數(shù)或改用染色分類計數(shù)。
    2、染色分類法:腦脊液標(biāo)本離心,取沉淀涂片,制成均勻薄膜,置室溫或37℃孵箱中,干燥后以瑞氏染色,油鏡下進(jìn)行分類計數(shù)。以百分比表示之。
    四、病原體形態(tài)學(xué)檢查
    1、細(xì)菌 臨床懷疑流行性腦脊髓膜炎或化膿性腦脊髓膜炎時,應(yīng)做細(xì)菌學(xué)涂片檢查。操作如下:
    (1)腦脊液標(biāo)本2~3ml,以3000rpm離心15分鐘,去上清液,將沉淀物涂在潔凈玻璃片上,共制片2張,涂片自然或在37℃溫箱中干燥固定,且勿用火焰固定。
    (2)涂片固定后,一張用亞甲藍(lán)染色,另一張用革蘭氏染色。
    (3)革蘭氏染色涂片用于檢查肺炎雙球菌、流感桿菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、鏈球菌、大腸桿菌等,亞甲藍(lán)染色用于檢查腦膜炎雙球菌。如找到細(xì)菌,則按其染色性質(zhì)及形態(tài)報告。
    (4)如懷疑結(jié)核性腦膜炎,可將腦脊液標(biāo)本靜置24小時,取其液面薄膜涂片,置37℃溫箱中干燥固定,作抗酸染色,油鏡下找抗酸桿菌。
    (5)采集標(biāo)本時應(yīng)注意污染。顯微鏡觀察時應(yīng)注意細(xì)胞內(nèi)外的細(xì)菌形態(tài),報告時應(yīng)予以描述。
    2、真菌檢查—新型隱球菌的檢查
    (1)取腦脊液標(biāo)本,以2000rpm離心10分鐘,沉淀物涂片,加經(jīng)過過濾的優(yōu)質(zhì)細(xì)墨汁一滴,混合后加蓋玻片顯微鏡下檢查。
    (2)先用低倍鏡觀察,如發(fā)現(xiàn)在黑色背景下有圓形透光小點(diǎn),中間有一細(xì)胞大小的圓形物質(zhì),即轉(zhuǎn)用高倍鏡仔細(xì)觀察其結(jié)構(gòu),新型隱球菌直徑5~20μm,可見明顯的厚夾膜,周圍有較強(qiáng)的折光,并有出芽的球形孢子。
    (3)發(fā)現(xiàn)上述特征,即可報告墨汁涂片找到“隱球菌屬”。并須進(jìn)一步作真菌培養(yǎng)。 

腦脊液的顯微鏡檢查注意事項(xiàng)

  • 1、檢查前禁忌:無
    2、檢查時要求:腦脊液細(xì)胞計數(shù)應(yīng)及時進(jìn)行,一般應(yīng)在1小時內(nèi)進(jìn)行;穿刺損傷血管,導(dǎo)致血性腦脊液,細(xì)胞總數(shù)已無意義,白細(xì)胞計數(shù)也須校正后才有意義;細(xì)胞計數(shù)時,如發(fā)現(xiàn)較多的紅細(xì)胞有皺縮或腫脹現(xiàn)象,應(yīng)予以描述,以協(xié)助臨床醫(yī)生鑒別陳舊或新鮮出血;細(xì)胞計數(shù)時,須注意把紅細(xì)胞或淋巴細(xì)胞與新型隱球菌相區(qū)別:1、新型隱球菌具有“出芽”現(xiàn)象,不溶于乙酸,滴加0.35mol/L的乙酸后,顯微鏡下仍保持原形,而紅細(xì)胞則被乙酸溶解消失,淋巴細(xì)胞則胞核和胞漿更為明顯。2、滴加印度墨汁一滴,加蓋玻片,高倍鏡下見新型隱球菌有夾膜,不著色,而紅細(xì)胞或淋巴細(xì)胞無此現(xiàn)象。細(xì)胞計數(shù)板用完后,應(yīng)用75%的酒精消毒60分鐘。忌用苯酚消毒,因有損計數(shù)池的刻度。
    不合宜人群:無。

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