固相酶免疫測定技術(shù)概述
固相酶免疫測定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面(包被),并保持其免疫活性;用酶標記(另一種)抗原或抗體,保留其免疫活性和酶活性;在測定時,把待測標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應;用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開,結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例;加入酶反應的底物后,底物被酶催化顯色,故可根據(jù)顏色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,具有放大反應的效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。根據(jù)測定對象的不同,ELISA有多種反應類型。
固相酶免疫測定技術(shù)正常值
不同項目檢測的正常值不同,一般小于一定的范圍內(nèi)?;蛘呤顷幮越Y(jié)果。
固相酶免疫測定技術(shù)臨床意義
異常結(jié)果:酶結(jié)合物與相應抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的。因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果?!?br /> 需要檢查的人群:一般是免疫力低下或者出現(xiàn)有關(guān)免疫學疾病的患者需要檢查。
固相酶免疫測定技術(shù)檢查方法
測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應結(jié)合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便訊速,特異性強。
固相酶免疫測定技術(shù)注意事項
一般要求早晨空腹檢查,禁忌暴飲暴食和辛辣食品后檢查。
在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,超過1周測定的需低溫冰存。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應。