隱球菌病補體結合試驗概述
新生隱球菌(cryptococus neoformans)系半知菌亞門、芽生菌綱、隱球酵母目、隱球酵母科、隱球酵母菌屬中真菌。本屬中雖種類較多,目前認為主要病原真菌為新生隱球菌。本菌廣泛分布于自然界,屬土壤真菌,但常寄生于鳥類特別是鴿子的糞便中。新生隱球菌易侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng),原發(fā)灶主要為肺,少有皮膚或粘膜?;颊咧杏?0%以上是與白血病、何杰金氏病、糖尿病以及艾滋病有關,另外臟器移植者也易感染。細胞免疫功能低下是誘發(fā)本病的重要原因。
隱球菌病補體結合試驗正常值
陰性。
隱球菌病補體結合試驗臨床意義
陽性新型隱球菌感染(中樞神經(jīng)系統(tǒng)和全身性)。
結果陽性可能疾病:隱球菌病。
隱球菌病補體結合試驗檢查方法
(1)補體和溶血素的滴定。
①取補體1ml,加BBS 9ml,依次稀釋成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同時取50%的溶血素 0.2ml,加BBS 9.8ml,即為1∶100的溶血素,然后繼續(xù)稀釋成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。
②采取方陣排列試管,縱行各管加不同濃度的補體0.1ml,橫排各管加溶血素0.1ml(皆應從最高稀釋度加起)混勻后,各管加BBS 0.2ml,補體和溶血素對照管各加BBS0.3ml,最后在各管中加2%羊紅細胞0.1ml。各管總量為0.5ml,搖勻,放37℃水箱中30min,觀察結果。
以完全溶血的補體和溶血素最高稀釋度為各自的單位。上表(表1)中溶血素1∶3200為一個溶血素單位,補體1∶80為一個補體單位。在實際應用時,溶血素用2u(3200÷2=1600),補體用2.5u(80÷2.5=32)。
(2)正式試驗:
①用V型微量反應板操作,每份標本作一個試驗孔,一個血清對照孔。各孔內(nèi)先加BBS 0.025ml。
②用稀釋棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋轉后移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀釋。
(3)結果判斷:凡對照組各管的結果應符合以下情況,否則應重做。
補體對照管:2.5u=0,1u=0~±,0.5u=3~4。羊紅細胞對照管:4??贵w對照管:0。陰性對照管;1∶2~1∶256=0。陽性對照管:同一份陽性血清,每次結果應一致。
當各測定管反應最強一管仍為±報告可疑,1~4報告陽性。如測定管和血清對照管均抗補體,全部測定管皆為0,報告陰性。
檢查抗體的方法與檢查抗原的方法一樣,只是改用4個單位已知抗原,藉以測定被檢血清。
隱球菌病補體結合試驗注意事項
有人認為隱球菌的出現(xiàn)對艾滋病的診斷有一定參考價值。