特異性脂酶染色概述
陽性反應幾乎僅出現(xiàn)在各階段的粒細胞中,比POX更具特異性,AS-DCE又稱為粒細胞特異性酯酶。粒細胞內(nèi)的氯醋酸AS-D萘酚酯酶水解基質(zhì)液中氯醋酸AS-DCE萘酚后產(chǎn)生萘酚AS-D,后者再與穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián),生成不溶性紅色沉淀,定位于胞質(zhì)中。
特異性脂酶染色正常值
陽性反應為紅寶石色顆粒,定位于胞漿中。
特異性脂酶染色臨床意義
特異性酯酶又稱粒細胞酯酶,主要分布在粒細胞和肥大細胞內(nèi)。原粒細胞為陰性或弱陽性反應,早幼粒細胞和中幼粒細胞呈強陽性反應,分葉核粒細胞酶活性減弱。嗜酸性粒細胞呈陰性,嗜堿性粒細胞、單核細胞和肥大細胞呈陰性或弱陽性反應。巨核細胞、血小板、漿細胞、紅系細胞及淋細胞呈陰性。本染色法主要用于鑒別急性白血病類型。急性粒細胞白血病時,原粒細胞和幼稚粒細胞均呈一定程度陽性,成熟粒細胞酶活性下降。急性單核細胞白血病和急性淋巴細胞白血病時呈陰性。急性粒-單核細胞白血病時,部分白血病細胞(原粒和早幼粒細胞)呈陽性,有些白血病細胞(原單核和幼單核細胞)呈陰性。
特異性脂酶染色檢查方法
(1)固定:新鮮干燥涂片,用甲醛-甲醇固定液固定30s,或用甲醛蒸氣薰5~10min。
(2)水洗,涼干。
(3)放入作用液,37℃ 30min。
(4)水洗,蘇木素染液復染l~2min。
(5)水洗,晾干,鏡檢。
附注:
染色溫度以38~39℃,此時酶反應強而無明顯擴散,并且萘酚和堅牢紫醬GBC較低溫時易溶解。
特異性脂酶染色注意事項
染色溫度以38~39℃,此時酶反應強而無明顯擴散,并且萘酚和堅牢紫醬GBC較低溫時易溶解。