纖溶酶概述
纖溶酶(Plasmin,PL)是PLG在其激活物(PA)的作用下產(chǎn)生的,是導(dǎo)致纖維蛋白降解最直接的因子。生理狀態(tài)下,PL與PLG、t-PA等結(jié)合在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面,一旦有少量纖維蛋白形成,PLG被激活為PL,后者則在局部將纖維蛋白降解,以避免血栓形成,保證血流通暢。
纖溶酶正常值
纖溶酶活性
85.55%±27.83%(發(fā)色底物法)。
21.1~48.9U(剛果紅顯色法)。
纖溶酶臨床意義
1、運(yùn)動(dòng)對(duì)纖溶系統(tǒng)的影響
Weiss等為探討運(yùn)動(dòng)程度(中、重)與凝血、纖溶系統(tǒng)的關(guān)系,檢測(cè)了12例健康男性在騎踏車1h前后反映血漿凝血酶、纖維蛋白和纖溶酶形成的指標(biāo)。結(jié)果顯示,在中等度的運(yùn)動(dòng)中t-PA抗原從3.7±0.5ng/ml升高到14.6±1.8ng/ml,P<0.01,PAP從2.1±0.3nmol/L升高到4.2±0.7nmol/L,P<0.01。然而,血漿凝血酶原片段1+2(pro-thrombinfragment1+2,F(xiàn)1+2)、凝血酶-抗凝血酶Ⅲ復(fù)合物(thrombin-antithrombinⅢcomplexes,TAT)和纖維蛋白肽A(fibrin-opeptideA,F(xiàn)PA)卻無(wú)明顯變化。重度運(yùn)動(dòng)后,t-PA和PAP的水平分別超過(guò)正常高限的2.5倍及2倍,而血漿中F1+2、FAT、FPA卻在正常范圍內(nèi)明顯增高(P值分別<0.01、<0.05、<0.01)。研究認(rèn)為在健康的年輕個(gè)體中,運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致凝血活性增高的同時(shí)也引起纖溶活性增高,中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)僅導(dǎo)致纖溶酶形成,而重強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)纖溶酶的形成超過(guò)了凝血酶和纖維蛋白的形成。
2、在纖維蛋白溶解亢進(jìn)癥的意義
機(jī)體內(nèi)纖溶系統(tǒng)活性是由于纖溶酶出現(xiàn)的結(jié)果,而纖溶酶在血中的活性是由釋放入血的激活物而調(diào)控。因此各種原因?qū)е碌睦w溶亢進(jìn)癥,無(wú)論是先天性還是后天獲得性,無(wú)論是原發(fā)還是繼發(fā)性,最終結(jié)果是纖溶酶生成過(guò)多而導(dǎo)致纖溶酶活性增強(qiáng)。對(duì)肝病患者纖溶酶的檢測(cè)結(jié)果顯示急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化病人血漿纖溶酶明顯升高,表明此時(shí)患者纖溶酶活性增強(qiáng)。
3、在血栓前狀態(tài)及血栓性疾病中的意義
血栓前狀態(tài)及血栓性疾病中常由于t-PA活性及含量減低和PAI-1活性增高而導(dǎo)致纖溶酶活性(PL)減低。缺血性腦病患者α2-AP水平降低而纖溶酶-α2-AP復(fù)合物(PAP)增高,有資料表明,缺血性腦病患者PAP水平(1.09±0.45mg/L)明顯高于正常對(duì)照組(0.59±0.13mg/L)。血栓性疾病,如急性心肌梗死、肺梗死、深靜脈血栓、腎病綜合征、DIC等引起的繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)時(shí)PAP水平增高。Oikawa等對(duì)42例腎病綜合征患兒檢測(cè)了血漿PAP(PL-α2-AP)和D-Dimer等,發(fā)現(xiàn)在腎病綜合征的活動(dòng)期PAP(0.67±0.48μg/ml)及D-Dimer(154±105ng/ml)水平與其靜止期(PAP0.43±0.18μg/ml,D-Dimer72±48ng/ml)比較具有顯著性差異(P<0.01,P<0.001)。盡管臨床上尚未發(fā)現(xiàn)血栓形成,但PAP、D-Dimer水平升高卻能反映腎病綜合征時(shí)的血液高凝狀態(tài)。
4、血栓性疾病溶栓治療中的意義
在血栓性疾病如急性心肌梗死、肺栓塞、靜脈血栓形成等應(yīng)用溶栓藥物(如鏈激酶、尿激酶、t-PA或重組t-PA等)進(jìn)行溶栓治療時(shí),由于外源性纖溶酶原激活物的作用使纖溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶,由此而降解纖維蛋白(原)達(dá)到溶解血栓的目的。因此溶栓后纖溶酶活性增高。纖溶酶-α2-AP復(fù)合物(PAP或PIC)增高,有報(bào)道α2-AP與纖溶酶形成的復(fù)合物(PAP)是可以靈敏地反應(yīng)纖溶系統(tǒng)激活的分子標(biāo)志物。應(yīng)用溶栓藥物治療時(shí)血漿PAP可明顯增高。
纖溶酶檢查方法
試劑
1、硼酸緩沖液(pH7.8):硼酸6.184g,KOH 7.456g,蒸餾水500ml,0.1mmol/LNaOH溶液53ml,加蒸餾水至1000ml。
2、1g/L剛果紅溶液:剛果紅0.5g加生理鹽水500ml。
3、1mol/L HCl溶液。
4、50g/L CaCl2溶液。
5、基質(zhì)粉制備:血漿與生理鹽水、50g/L CaCl2溶液按10∶100∶5比例混勻,37℃水浴60min,用玻棒將纖維蛋白全部卷出,用生理鹽水洗滌兩次后,擠干,置56℃溫箱中烘干備用。取10g纖維蛋白,加1g/L剛果紅溶液100ml,37℃水浴中不斷攪拌,保溫30min,3000r/min離心10min,棄去上清液,用pH7.8硼酸緩沖液反復(fù)洗滌至上清無(wú)色為止,將與剛果紅結(jié)合的纖維蛋白置56℃溫箱烘干備用。
6、分光光度計(jì)。
操作方法
離心上述溶液,取上清,分光光度計(jì)600nm波長(zhǎng)比色,空白調(diào)0,測(cè)其吸光度值,查標(biāo)準(zhǔn)曲線即可得出纖溶酶活性。
纖溶酶注意事項(xiàng)
檢測(cè)前禁止服用抗凝藥物,如阿斯匹林等。