脫落細胞檢查概述
癌瘤組織代謝高,癌細胞的表面缺乏鈣和透明質(zhì)酸酶,彼此粘著力比正常細胞低,易于脫落。疑為口腔癌,應在口腔內(nèi)任何結(jié)節(jié)和經(jīng)久不愈的潰瘍處采樣。疑是鼻咽癌時,于鼻咽部可疑部位采樣。高度懷疑肺癌時,應取支氣管咳出的新鮮痰液,或在纖維支氣管鏡直視下,采取病灶部位分泌物。
脫落細胞檢查正常值
細胞學診斷的分級標準,系據(jù)巴氏五級法。
正常:
Ⅰ級:陰性。無核異質(zhì)細胞,涂片中均為正常細胞或一般退變細胞。
異常:
Ⅱ級:核異質(zhì)。涂片中發(fā)現(xiàn)少量核異質(zhì)細胞,由高度炎癥增生所致。
Ⅲ級:可疑。涂片中見重度核異質(zhì)細胞,其形態(tài)基本符合惡性腫瘤細胞標準,但數(shù)量過少,還不能完全排除癌前期病變或高度炎癥墳生的可能,建議臨床重復送檢。
Ⅳ級:陽性。涂片中發(fā)現(xiàn)典型癌細胞,有時根據(jù)癌細胞形態(tài)特征及分布,初步進行分類。
脫落細胞檢查臨床意義
疑為口腔癌,應在口腔內(nèi)任何結(jié)節(jié)和經(jīng)久不愈的潰瘍處采樣。疑是鼻咽癌時,于鼻咽部可疑部位采樣。高度懷疑肺癌時,應取支氣管咳出的新鮮痰液,或在纖維支氣管鏡直視下,采取病灶部位分泌物。
疑有乳癌可取乳頭溢液涂片檢查,或切除乳腺腫塊進行病理檢查。可疑食道癌,應于x線提示部位作食道拉網(wǎng)法,或在食道鏡直視下擦拭病灶處取樣。擬診胃癌時,應取胃沖洗液或胃液作沉渣標本,或在纖維胃鏡直視下于病灶處采樣。
在十二指腸引流液中,如找到癌細胞,對十二指腸癌、膽道癌、胰頭癌等診斷很有幫助。若在內(nèi)窺鏡直視下,于十二指腸可疑處取樣檢查,對可視范圍內(nèi)癌的發(fā)現(xiàn)是有效的。應用逆行胰膽管造影(ERCP),可窺視乏特壺腹可疑腫瘤處采樣。疑似直腸癌時,可在直腸鏡直視下,擦拭病灶處采樣。對高位結(jié)腸癌時,采用纖維結(jié)腸鏡直視下取樣,可提高癌細胞的檢出率。
疑有腦膜癌或白血病、肺癌往腦轉(zhuǎn)移時,應注意腦脊液中癌細胞的檢查。疑為癌轉(zhuǎn)移性胸、腹水,查找癌細胞很有必要。懷疑輸尿管癌、膀胱癌,應取晨尿查找癌細胞。疑為前列腺癌,應取前列腺分泌液涂片、檢查。對宮頸糜爛患者,可作宮頸涂片或刮片找癌細胞,作為一種篩濾宮頸癌的主要方法,若有“宮頸間變”時,更應追訪檢查。用宮腔吸管吸取分泌物,查找癌細胞,有助于子宮內(nèi)膜癌的診斷。
脫落細胞檢查檢查方法
涂片制作方法:
(一)涂片前準備工作及涂片方法
1.涂片前準備工作
(1)保證標本新鮮,取材后盡快制片。
(2)涂操作要輕巧,避免擠壓以防止損傷細胞。涂片要均勻,厚薄要適度,太厚細胞堆疊,太薄細胞過少,均影響診斷。
(3)玻片要清潔無油漬,先用硫酸洗滌液浸泡沖洗,再用75%乙酸浸泡。
(4)含蛋白質(zhì)的標本可直接涂片,缺乏蛋白質(zhì)的標本,涂片前先在玻片上涂薄層粘附劑,以防止染色時細胞脫落,常用粘附劑為蛋白甘油,由等量生雞蛋白和甘油混合而成。
(5)每位患者的標本至少涂兩張玻片,以避免漏診。涂片后立即在玻片一端標上編號。
2.涂片制備方法
(1)推片法:用于稀薄的標本,如血液,胸、腹水等。取離心后標本一小滴滴在玻片偏右側(cè)端,用推片用30度夾角將玻片上檢液輕輕向左推。
(2)涂抹法:適用于稍稠的檢液,如鼻咽部標本。用竹棉簽在玻片上涂布,由玻片中心經(jīng)順時針方向外轉(zhuǎn)圈淫抹;或從玻片一端開始平行涂抹,涂抹要均勻,不宜重復。
(3)壓拉涂片法:將標本夾于橫豎交叉的兩張玻片之間,然后移動兩張玻片,使之重疊,再邊壓邊拉,獲得兩張涂片。該法適用于較粘稠標本,如痰液。
(4)吸管推片法:用吸和將標本滴在玻片一端,然后將滴管前端平行置于標本滴上,平行向另一端均速移動滴管即可推出均勻薄膜。此法亦適用于胸、腹水標本。
(5)噴射法:用配細針頭的注射器將標本從左至右反復均勻地噴射在玻片上,此法適用于各種吸取的液體標本。
(6)印片法:將切取的病變組織用手術(shù)切開,立即將切面平放在玻片上,輕輕按印。此方法為活體組織檢查的輔助方法。
(二)涂片的固定
固定(fication)的目的是保持細胞自然形態(tài),防止細胞自溶和細菌所致的腐敗;固定液能沉淀和凝固細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和破下細胞內(nèi)溶酶體酶,使細胞不但保持自然形態(tài),而且結(jié)構(gòu)清晰,易于著色。因此標本愈新鮮,固定愈及時,細胞結(jié)構(gòu)愈清晰,染色效果愈好。
1.固定液:細胞學檢查常用的固定液有下列三種:第一種乙醚酒清固定液:該固定液滲透明性較強,固定效果好適用于于一般細胞學常規(guī)染色;二種是氯仿酒精固定液:又稱卡諾氏固定液。其優(yōu)點同上;第三種95%酒精固定液:適用于大規(guī)模防癌普查。制備簡單。但滲透作用稍差。
2.固定方法
(1)帶濕固定:涂片后未待標本干燥即行固定的方法稱帶濕因定。此法因定細胞結(jié)構(gòu)清楚,染色新鮮。適用于巴氏或HE染色。痰液、陰道分泌物及食管拉網(wǎng)涂片等常任常用此方法。
(2)干燥因定:涂片后未待其自然干燥,再行固定。適用于稀薄標本如尿液、胃沖洗液等,也適用于于瑞特染色和姬姆薩染色。
3.固定時間:一般為15-30min。含粘液較多標本,如痰液、陰道分泌物、食管拉網(wǎng)等因定時間在適當延長;尿液、胸、腹水等涂片不含粘液,固定時間可酌情縮短。
(三)涂片的染色
1.染色的目的和原理:染色的日的是借助于一種或多種染料,使組織和細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)分別著不同的染色,這樣在顯微鏡下能清楚地觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),作出正確判斷。
組織細胞染色原理至今尚無滿意的解釋,可能是物理作用,也可能是化學作用,或者是兩者綜合作用的結(jié) 果。
染色的物理作用是利用毛細管現(xiàn)象,滲透、吸收和吸附作用,使染料的色素顆粒牢固地進入組織細胞,并使其顯色。
染色的化學作用是滲入組織細胞的染料與其相應的物質(zhì)起化學反應,產(chǎn)生有色的化合物。
各染料都具有兩種性質(zhì),即產(chǎn)生顏色;征收被組織形成親和力。這兩種性質(zhì)主要由發(fā)色基因和助色基因所產(chǎn)生的。
發(fā)色基團:苯的衍生物具有可見光區(qū)吸收帶。這些衍生物顯不的吸收帶與其價鍵的不穩(wěn)定性有關(guān),如對苯二酚為無色,當其氧化后失去兩個氫原子,它的分子或則變?yōu)橛悬S色的對醌,這種產(chǎn)生顏色的醌式環(huán)稱為發(fā)色基團。若一種化合物含有幾個環(huán),只要其中有一個醌式環(huán)就會發(fā)出顏色,稱此發(fā)色基團為色原(chromogen).
助色基團:是一種能使化合物以生電離作用的輔助原子團(酸堿性基團)。它能使染色的色澤進一步加深,并使其與被染色組織具有親和力。
助色基團的性質(zhì)決定染料是酸性堿性。堿性染料具有堿性助色基團,在溶媒中產(chǎn)生的帶色部分為帶正電荷的陽離子,吻與組織細胞內(nèi)帶負電荷的物質(zhì)結(jié)合而顯色。如細胞核內(nèi)的主要化學成分脫氧化核糖核酸易被蘇木素染成紫藍色,稱嗜堿性。酸性染料具有酸性用力色基團,在溶酶中產(chǎn)生帶色部分為陰離子,易與組織細胞內(nèi)帶正電荷部分結(jié)合而顯色,此性質(zhì)被稱為嗜酸性,如細胞漿內(nèi)訂成分為蛋白質(zhì),易與伊紅或橘黃結(jié)合呈紅色或橘黃色。
2.常用染色方法:臨床日常工作中較為常用的染色方法有下列3種:
(1)巴氏染色法:本法染色特點是細胞具有多色性顏色,色彩鮮艷多彩。涂片染色的透明性好,胞質(zhì)顆粒分明,胞核結(jié)構(gòu)清晰,如鱗狀上皮過度角化細胞胞質(zhì)呈橘黃色;角化細胞顯粉紅色;而角化前細胞顯淺綠色或淺藍色,適用于上皮細胞染色或觀察陰道涂片中激素水平對上皮細胞的影響。此方法的缺點是染色程序比較復雜。
(2)蘇木精—伊紅(hemotoxylin eosin,HE)染色法:該方法染色透明度好,核與胞質(zhì)對比鮮明。染色步驟簡便,效果穩(wěn)定。適用于痰液涂片,觖質(zhì)核呈紫藍色,胞質(zhì)淡玫瑰紅色,紅細胞呈淡朱紅色。
(3)瑞特—吉姆薩染色法(wrightgiemsa atain);本方法多用于血液,骨髓細胞學檢查。胞質(zhì)內(nèi)顆粒與核安危質(zhì)結(jié)構(gòu)顯示較清晰。操作簡便。
脫落細胞檢查注意事項
口腔活檢注意事項:
1、術(shù)前詳細詢問病史,進行血常規(guī)檢查,排除不能耐受手術(shù)的嚴重疾病。
2、術(shù)前談話應向患者及家屬說明手術(shù)意義、手術(shù)風險、征得患者及家屬的同意。
3、患者不能在空腹狀態(tài)下接受手術(shù)。
4、使用2%普魯卡因做局麻時應常規(guī)做皮試。
5、對于不能一次切除的病損切忌勉強切除。
6、必須手術(shù)治療,而術(shù)前活檢對疾病本身治療不利者應避免活檢(如惡性黑色素瘤、頸動脈體瘤、血管瘤等)。
乳腺癌活檢注意事項:
l、如果腫物的體積小(2.5厘米以下),與周圍組織無粘連者,應盡可能完整切除,然后用10%福爾馬林固定,即刻送病理科做切片檢查。
2、如果腫瘤與皮膚粘連,在活體組織檢查時應將皮膚作菱形切除,以便術(shù)后縫合。
3、如腫物的體積較大并與周邊粘連,完整切除難度較大,又懷疑惡性者,在切除標本時,要盡可能地切除病變明顯處及不同部位的組織2~3塊,做病理切片。
4、如腫塊遠離乳頭,切取活檢標本時,皮膚應以乳頭為中心作輻射狀切口,這樣既可減少切斷輸乳營的數(shù)目,又不影響以后作根治切除手術(shù)。
5、如腫塊與乳頭較近,要盡可能沿乳暈與乳房皮膚交界處作環(huán)狀切口,這樣增痕不明顯。
6、在切取乳房可疑組織時必須達到足夠的深度,以免僅僅取到癌瘤表面的壞死組織或只取到少許細胞,難以作出病理組織學論斷。
7、凡懷疑癌性腫塊,切除時絕不要切經(jīng)癌瘤組織,否則,易造成癌細胞的播散和污染。
鼻咽癌活檢注意事項:
1、有以下情況,應向醫(yī)生說明,或暫緩檢查:發(fā)熱、血壓高、有出血性疾病、婦女經(jīng)期等;
2、檢查時應攜帶有關(guān)實驗室檢查結(jié)果、CT或MR片等,以供醫(yī)生參考;
3、檢查前,護士用2%麻黃素噴霧雙側(cè)鼻腔以收縮下鼻甲,用1~2%的卡因噴霧雙側(cè)鼻腔及吸入鼻咽作表面麻醉;
4、患者仰臥于操作室檢查床上,頭、手不要亂動,有不適可說明;
5、如檢查中發(fā)現(xiàn)有可疑,需要活檢,這是一個創(chuàng)傷性較小的檢查,不必太緊張,活檢后,可有短暫的少量出血,不要大力吸涕及擤鼻,留觀半小時左右,無活動性出血即可回家休息,應避免太熱以及刺激性強的飲食。
胃腸道活檢注意事項:
1、低張藥物的應用:654-2,成人劑量15~20 mg,肌注10 min后檢查。對于654-2過敏者,可用胰高糖素。
2、檢查前應注意禁忌證,適應證,懷疑胃腸道梗阻、穿孔。1周內(nèi)出血史或1周內(nèi)內(nèi)鏡活檢者禁做。
3、產(chǎn)氣粉應定量3~6 g,檢查過程中不能打嗝,以免氣體排出影響雙對比效果。
4、分段攝取賁門、胃底、胃體及胃竇部;仰臥位,俯臥位及充盈相,黏膜加壓相缺一不可,否則易漏診。
5、胃腸檢查的同時應注意胃腸輪廓的改變?nèi)纾焊巫笕~占位病變壓迫胃底及胃體上部(筆者就曾于近2年內(nèi)發(fā)現(xiàn)4例肝左葉占位壓迫胃底造成胃底左緣壓跡,經(jīng)B超,CT確診為肝癌),胰腺占位壓迫胃竇等。
骨髓檢查注意事項:
1、必需嚴格無菌操作,嚴防骨髓感染。
2、初診病人行骨髓穿刺應在治療之前。
3、吸取骨髓液量以0.1~0.2ml為宜。
4、死亡病例需作骨髓檢查時應在死后半小時內(nèi)進行為宜。
5、注射器和穿刺針必須干燥,以免發(fā)生溶血。
6、穿刺針頭進入骨質(zhì)后避免擺動過大,以免折斷。
7、髓液抽出后應立即涂片,以免凝固。
8、有出血傾向的病人術(shù)后應適當延長穿刺點的壓迫時間,并注意有無術(shù)后出血。