核酸的分子雜交概述
核酸的分子雜交是定性或定量檢測(cè)特異RNA或DNA序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的堿基互補(bǔ)原則而發(fā)展起來(lái)的。在堿性環(huán)境中加熱或加入變性劑等條件下,雙鏈DNA之間的氫鍵被破壞(變性),雙鏈解開成兩條單鏈。這時(shí)加入異源的DNA或RNA(單鏈)并在一定離子強(qiáng)度和溫度下保溫(復(fù)性),若異源DNA或RNA之間的某些區(qū)域有互補(bǔ)的堿基序列,則在復(fù)性時(shí)可形成雜交的核酸分子。
核酸的分子雜交正常值
體內(nèi)菌群的種類和比例正常,人體處于動(dòng)態(tài)平衡。
核酸的分子雜交臨床意義
針對(duì)白領(lǐng)族長(zhǎng)期緊張工作狀態(tài)引起的脂肪肝、肥胖癥、高血脂、心血管病等慢性病進(jìn)行健康篩查,及早發(fā)現(xiàn)潛在的危害健康危險(xiǎn)因素,同時(shí)提出全面健康改善方案。
異常結(jié)果各種病原微生物感染導(dǎo)致的病癥以及各種不健康癥狀。
需要檢查的人群有各種病原微生物感染者、腫瘤或者癌癥患者。
核酸的分子雜交檢查方法
(1) rRNA-DNA雜交:變性rRNA與變性DNA混合時(shí),rRNA與其互補(bǔ)的DNA鏈形成雜交雙鏈,rRNA分子與異源DNA雜交時(shí),也能在其同源區(qū)形成互補(bǔ)雙鏈,這種雜交雙鏈的穩(wěn)定性與其同源性成正相關(guān),適于細(xì)菌屬及屬上水平的分類研究?,F(xiàn)最常用的是硝酸纖維膜結(jié)合法。
(2) 核酸探針技術(shù):
應(yīng)用核酸探針技術(shù)檢測(cè)病原微生物核酸是臨床診斷學(xué)的重大發(fā)展,其原理是用帶有酶、化學(xué)熒光物、放射性核素或生物素標(biāo)記的已知序列特定DNA片段(稱為探針),在一定條件下,按堿基互補(bǔ)原則探針與待測(cè)標(biāo)本中的核酸雜交,通過(guò)對(duì)雜交信號(hào)的檢測(cè),從而鑒定標(biāo)本中有無(wú)相應(yīng)的病原微生物基因及其分子大小。常用核酸探針技術(shù)有固相雜交(斑點(diǎn)雜交、原位雜交、Southern印跡、Northern印跡等。)和液相雜交技術(shù)。
核酸探針適用于直接檢出臨床標(biāo)本中的病原微生物,不受非病原微生物的影響,因此對(duì)某些尚不能分離培養(yǎng)或很難分離培養(yǎng)的微生物的檢測(cè)具有重要的意義。隨著探針標(biāo)記的不斷改進(jìn),檢測(cè)試劑盒商品化,操作更簡(jiǎn)便易行。
核酸的分子雜交注意事項(xiàng)
不合宜人群: 沒有。
檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習(xí)慣,注意個(gè)人衛(wèi)生。
檢查時(shí)要求:積極配合醫(yī)生。