小兒過敏癥 的檢查：

皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn) 青霉素皮內(nèi)試驗(yàn) 蛋白電泳 過敏原篩選 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn) 被動(dòng)轉(zhuǎn)移試驗(yàn)

1.非特異性診斷 有如：血、痰液、鼻涕、眼分泌物、大便、中耳分泌物等的嗜酸性粒細(xì)胞檢查;血、其他體液或分泌物中組織胺含量的測定;血清及分泌物中IgE、IgA、IgG、IgM含量的測定;肺功能測定;T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn);補(bǔ)體Ch50、Ch2、C3、C4測定;巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn);白細(xì)胞吞噬指數(shù)測定;血及尿中17酮、17羥類固醇測定;血漿蛋白電泳測定;紅細(xì)胞沉降試驗(yàn);血中抗溶血性鏈球菌抗體滴度測定;類風(fēng)濕因子測定;抗原抗體復(fù)合物測定;血中紅斑狼瘡細(xì)胞檢查;以及血、尿、大便的常規(guī)檢查等。此等檢測方法對不同的變態(tài)反應(yīng)病均有其各自的診斷意義，可以選擇采用。
2.體內(nèi)特異性診斷 目前在變態(tài)反應(yīng)臨床上采用最廣的體內(nèi)特異性診斷方法，首推皮膚試驗(yàn)法。此外還有各種皮膚以外的試驗(yàn)方法，包括鼻黏膜、支氣管黏膜、眼結(jié)膜及口腔黏膜試驗(yàn)等。
體內(nèi)特異性診斷的原理是：在外源性過敏病人的皮膚及體液內(nèi)含有一種特異性抗體，稱為反應(yīng)素或皮膚敏感抗體，亦即特異性IgE。當(dāng)相應(yīng)的抗原通過不同途徑進(jìn)入皮膚時(shí)，即與反應(yīng)素相結(jié)合，釋放變態(tài)反應(yīng)活性介質(zhì)，產(chǎn)生局部的過敏反應(yīng)，使皮膚充血、水腫、滲出、形成丘疹，在丘疹周圍出現(xiàn)紅斑，這就是特異性皮膚試驗(yàn)的陽性反應(yīng)。由于進(jìn)入皮膚的抗原的用量和濃度都是經(jīng)過嚴(yán)格控制的，因此這一試驗(yàn)方法是比較安全的。反應(yīng)只發(fā)生在局部。但是亦有極少數(shù)高度敏感的病人，即使在嚴(yán)格控制抗原濃度及劑量的情況下，仍可發(fā)生強(qiáng)烈的全身性反應(yīng)，甚至有由于皮膚試驗(yàn)而引發(fā)過敏休克致死者。如由青霉素皮膚試驗(yàn)而造成休克死亡的病例已迭有發(fā)生。但自從我們開展臨床變態(tài)反應(yīng)工作40余年來，采用特異性皮膚試驗(yàn)已不下數(shù)十萬人次，尚未發(fā)生過一例由皮試引起致命反應(yīng)者。偶見有因特異性皮膚試驗(yàn)而出現(xiàn)哮喘發(fā)作或周身性蕁麻疹等反應(yīng)者，經(jīng)過適當(dāng)?shù)奶幚砭芗皶r(shí)控制。這說明目前所用的方法，如嚴(yán)格掌握操作規(guī)程，作好必要的應(yīng)急準(zhǔn)備，總的說來是安全的。
(1)體內(nèi)特異性診斷的適應(yīng)證：
①速發(fā)型外源性過敏的病人或延緩型變態(tài)反應(yīng)中屬于接觸性過敏的病人。
②試驗(yàn)時(shí)病人應(yīng)不在強(qiáng)烈的過敏發(fā)作期。
③近期內(nèi)未使用過腎上腺皮質(zhì)激素、抗組織胺藥物、腎上腺素、麻黃堿或其他類似藥物。
④病人受試部位的皮膚不在非特異性激惹性強(qiáng)烈的狀態(tài)下。例如明顯的皮膚劃痕癥等。此類病人如作皮膚試驗(yàn)容易產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。
⑤病人受試部位的皮膚應(yīng)沒有濕疹、蕁麻疹或其他皮膚損害。
(2)體內(nèi)特異性診斷的種類和方法：
①貼斑試驗(yàn)(patch test)：這是一種較為古老的方法，亦稱斑貼試驗(yàn)。早在1896年，瑞士皮膚科醫(yī)生Jadasson創(chuàng)用此法以調(diào)查可疑藥物過敏病人的致敏病因。這是一種相當(dāng)簡單而安全的方法，至今仍被沿用。
試驗(yàn)的具體方法是：對可疑過敏的藥物、食物或吸入物，如屬固體物質(zhì)則先把它研成細(xì)末或粉碎，然后取一小撮放置于病人前臂腹面皮膚上，再放一滴0.1mol/L的氫氧化鈉溶液或生理鹽水。輕輕將粉末與水調(diào)和，待其半干，外面覆蓋一片不吸水的玻璃紙或塑料薄膜，再以紗布包扎，保持試驗(yàn)物與皮膚緊密接觸24～48h，然后揭除敷料，觀察試驗(yàn)物接觸部分的皮膚有無紅腫、皮疹、皮癢、潰爛等反應(yīng)。如有上述情況，即屬陽性反應(yīng)。如皮膚呈輕度紅腫、皮疹、皮癢，屬一度陽性反應(yīng)。如有散在小皮疹出現(xiàn)、明顯癢感，屬二度陽性反應(yīng)。如有成片的皮疹或大皰疹出現(xiàn)，則為三度陽性反應(yīng)。如出現(xiàn)皮膚滲出、潰瘍、壞死等，則屬四度陽性反應(yīng)。如在48h揭開敷料觀察反應(yīng)時(shí)尚未見特殊皮膚改變，亦可再延長接觸時(shí)間24h，待貼斑72h后再觀察一次;如此時(shí)仍無任何皮膚反應(yīng)，即屬陰性反應(yīng)。
最近，我們對布料、人造纖維及其他固態(tài)的可疑接觸性過敏原進(jìn)行貼斑試驗(yàn)時(shí)，采用模擬的人造汗液，作為濕潤劑進(jìn)行貼斑，比應(yīng)用0.1mol/L氫氧化鈉或生理鹽水更加近似發(fā)病時(shí)過敏原的自然接觸及吸收狀態(tài)，有更好的效果。人造汗液的配方為：氯化鈉3g，乳酸2ml，硫酸鈉1g，尿素2g，硬脂酸2ml，加入蒸餾水，使總量成為1L。
對原系液態(tài)的接觸變應(yīng)原，則直接將它涂滴在皮膚表面后加以包扎即可。觀察斑貼試驗(yàn)的結(jié)果，除于24～48h揭開敷貼物后觀察即刻反應(yīng)外，還應(yīng)于揭除斑貼物后12～24h，再看一次局部皮膚是否出現(xiàn)延遲陽性反應(yīng)。
斑貼試驗(yàn)的缺點(diǎn)在于有不少試驗(yàn)用過敏原不能為皮膚所吸收，因而往往得出假陰性的結(jié)果。反之，也有一些過敏原則對皮膚具有一定的非特異性刺激，又可能引起假陽性反應(yīng)。而且每次受試的品種有限，觀察的時(shí)間又較長，對于一些具有強(qiáng)陽性反應(yīng)的病人，應(yīng)在反應(yīng)早期即撤除敷貼物，不必等到24h或48h，以免反應(yīng)過重造成病人痛苦。
近年來我們還利用包裝丸藥的塑料鋁膜水泡眼包裝空囊將之洗凈干燥，剪成帽狀備用。使用時(shí)在此小帽內(nèi)先放入一潔凈脫脂棉小團(tuán)，然后將所需測試之變應(yīng)原溶液用滴管滴在棉團(tuán)上，然后將此小帽扣覆在前臂腹面皮膚上。另用一小帽滴以生理鹽水作為對照同時(shí)扣覆在前臂，用膠布固定小帽，24h，48h分別揭開小帽觀察皮膚反應(yīng)。此外亦可利用目前市售之“創(chuàng)可貼”繃帶，去其中央含雷文諾爾的紗布片，代之以多層潔凈白紗布，將待測抗原溶液滴在紗布上，然后將之封貼在前臂皮膚上，定時(shí)揭開觀察反應(yīng)，以上方法封貼穩(wěn)固，材料易得，操作簡便，可以一試。有些醫(yī)院亦有利用薄鋁片做成的杯狀斑貼帽備斑貼皮試用者。
斑貼試驗(yàn)最適用于接觸性變態(tài)反應(yīng)，實(shí)際上此法可以視為接觸性變態(tài)反應(yīng)的一次皮膚激發(fā)試驗(yàn)。近年來化妝品過敏，化學(xué)劑過敏以及不少職業(yè)性變態(tài)反應(yīng)均與皮膚接觸有關(guān)，故試驗(yàn)的適應(yīng)性日廣。當(dāng)前的困難是如何確定測試抗原的最適濃度是一個(gè)關(guān)鍵問題。濃度過低造成假陰性反應(yīng)，濃度過高又可造成假陽性反應(yīng)。國際及北美接觸性皮炎研究組(International and North American Contact Dermatitis Research Group)對少數(shù)化學(xué)劑已研討出可供參考的最佳斑貼濃度，有的廠商已將此做成油膏供貼斑皮試之用。
②抓傷試驗(yàn)(scratch test)：這也是一種比較簡單而安全的方法。由于試驗(yàn)時(shí)不需消毒或特殊設(shè)備，局部不痛、不出血，結(jié)果又較貼斑試驗(yàn)準(zhǔn)確而快捷，故比較適用于兒童。試驗(yàn)可在病人前臂的外側(cè)皮膚上進(jìn)行。如在嬰兒，由于臂部可供測驗(yàn)的皮膚面積過小，則可以利用背部兩側(cè)肩胛骨以內(nèi)的區(qū)域。
操作方法：用一把鈍緣的眼科白內(nèi)障小刀或用一枚化驗(yàn)室取血用的針，必要時(shí)用普通的粗縫針或注射用針亦可代替。目前我們用的是市場上出售的針灸醫(yī)師用的三棱針，由于它針柄較粗長，尖端大小適中，便于握持，不易損壞，特在此推薦。
試驗(yàn)時(shí)先持針在選定的皮膚表面，平行縱劃兩道長度為3～5mm、如‖狀的劃痕，亦有交叉劃成十字形或X形者。如所試物為粉狀的過敏原，則先在抓劃處的皮膚上滴1滴0.1mol/L的氫氧化鈉、生理鹽水或人造汗液，然后用一干凈的金屬小勺取抗原一小勺撒在液體上，輕加搗拌。我們目前采用市場上出售的鋁制耳挖勺，價(jià)廉而適用，耳勺的另一端圓鈍部分可用于搗拌。如所試是液態(tài)抗原，則在抓劃處滴上1滴抗原，待其自然晾干即可。
待抗原接觸皮膚抓劃處15～20min后，即可觀察反應(yīng)。抓傷試驗(yàn)結(jié)果的判定，往往各家有各自的經(jīng)驗(yàn)與標(biāo)準(zhǔn)。我們慣用的標(biāo)準(zhǔn)是：
A.抓劃處皮膚稍隆起，周邊有一淡紅斑時(shí)為(+)。
B.抓劃處有丘疹樣隆起，其長度超出抓劃的范圍，并在丘疹周邊有明顯紅斑者，為(++)。
C.抓劃處丘疹有偽足，四周有較寬，色紅而邊緣不規(guī)則的紅斑反應(yīng)者，為(+++)。
D.抓劃處丘疹有2個(gè)以上偽足，發(fā)癢，四周皮膚紅腫明顯者，為(++++)。
抓傷試驗(yàn)的注意事項(xiàng)：如同時(shí)進(jìn)行多種抗原測試，則每一抗原的試驗(yàn)次序與部位必須記憶清楚;必要時(shí)應(yīng)在皮膚上作出標(biāo)記，以免相互混淆。如用編組的多種抗原進(jìn)行皮試，則每種抗原的前后次序應(yīng)熟記。如用上臂外側(cè)皮膚進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，則抗原的排列程序，習(xí)慣上是由上而下，由左至右，每5種為1行，每臂分內(nèi)外2行，可共作10種，兩臂同時(shí)可作20種抗原的皮膚試驗(yàn)。如用背部肩胛間皮膚做試驗(yàn)，受試者若為成人，則從上到下，每行可作1O種，從左至右共6行，故每次可同時(shí)作60種抗原的皮膚試驗(yàn)。
試驗(yàn)時(shí)抓劃中所用的針及小勺應(yīng)多準(zhǔn)備數(shù)十至數(shù)百套，用完棄去以防抗原混雜，發(fā)生交叉反應(yīng)。每一種試驗(yàn)的上下左右間距離，至少3～5cm。一般測試部不必用酒精消毒皮膚，以免酒精引起的充血反應(yīng)干擾觀察結(jié)果。對于個(gè)別病人皮膚太臟者，可先用清水及肥皂清洗，待干后試驗(yàn)。如測試后15min內(nèi)皮試處已出現(xiàn)強(qiáng)烈反應(yīng)，可用棉花蘸蒸餾水將抗原拭去以免反應(yīng)進(jìn)一步發(fā)展。
③點(diǎn)刺試驗(yàn)(prick test)：也稱穿刺或挑刺試驗(yàn)(puncture test)，此法實(shí)際上是抓傷試驗(yàn)的一種改良。由于方法簡單方便，近年來國外變態(tài)反應(yīng)界采用此法者頗多。方法為，先在皮試部位滴上1滴抗原，然后用特制的點(diǎn)刺針在滴有抗原的皮膚中央點(diǎn)刺一下，將針尖按至皮內(nèi)約1mm，然后輕輕挑開上皮即可，不必過深，以不出血為度。亦有人利用16或17號的平頭注射針(如腮腺導(dǎo)管造影時(shí)所用注射造影劑的針頭)用于點(diǎn)刺試驗(yàn)的。用時(shí)先將針頭放入抗原瓶中，使針管內(nèi)灌入少量抗原溶液，然后以此針按壓點(diǎn)刺病人皮膚，效果亦頗滿意。
最近，我們亦利用鋸成小段的直徑3mm的細(xì)玻璃管作點(diǎn)刺試驗(yàn)。其優(yōu)點(diǎn)為管壁光潔，容易清洗，不生銹，少污染，價(jià)格便宜;如用此為兒童作皮試時(shí)，亦不致使兒童見針驚恐。由于玻管價(jià)廉，有的每用1次即可棄去，不再消毒重用。試驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意防止玻管折斷。點(diǎn)刺試驗(yàn)的觀測標(biāo)準(zhǔn)及注意事項(xiàng)，大致與抓傷試驗(yàn)相同。隨著點(diǎn)刺試驗(yàn)的推廣，近年國內(nèi)外均已制造出形狀不同的一次性不銹鋼點(diǎn)刺針備用。用后棄去，十分方便，進(jìn)針深度受針柄肩部的限制，可以控制劃一。點(diǎn)刺試驗(yàn)在國外，歐洲用得比北美更為廣泛。
進(jìn)入20世紀(jì)80年代以來，點(diǎn)刺試驗(yàn)日益推廣，點(diǎn)刺器械亦數(shù)經(jīng)改進(jìn)。在美國設(shè)計(jì)了一種稱之為Multitest的塑料點(diǎn)刺器，分為兩排，每排有4個(gè)點(diǎn)刺針頭，針頭做成刷狀。并配有8種常用變應(yīng)原試液。操作時(shí)將8種變應(yīng)原分別滴在8個(gè)點(diǎn)刺針頭上。將之按壓在病人前臂腹面皮膚，一次點(diǎn)刺同時(shí)可作8種變應(yīng)原的試驗(yàn)。意大利還設(shè)計(jì)了一種同時(shí)可作32種不同變應(yīng)原測驗(yàn)的塑料點(diǎn)刺器，點(diǎn)刺針頭為圓錐狀，針頭尾部均有一增粗的“肩”以控制進(jìn)針深度，此種點(diǎn)刺器稱之為普列洛測試器。
瑞典的Pharmacia公司將各種不同的變應(yīng)原包被在不銹鋼的點(diǎn)刺針頭上，分別消毒密閉包裝備用，測試時(shí)只要打開包裝，取出點(diǎn)刺針直接在病人皮膚上點(diǎn)刺即可，不必再用任何液體的變應(yīng)原。這種點(diǎn)刺試驗(yàn)稱之為“干點(diǎn)刺試驗(yàn)(dry prick test)”，極為方便，它的優(yōu)點(diǎn)還由于抗原處于干燥狀態(tài)不易降解，故使用的有效期可增至3年。上列各種點(diǎn)刺器均為一次性使用，無抗原交叉或操作污染之虞，并均備有陰性及陽性對照。由于點(diǎn)刺試驗(yàn)操作比皮內(nèi)試驗(yàn)簡便而安全。更適用于兒童，有些地區(qū)已取代皮內(nèi)試驗(yàn)。
④皮內(nèi)試驗(yàn)(intradermal test或intracutaneous test)：這是目前各種體內(nèi)特異性試驗(yàn)中應(yīng)用最廣、結(jié)果較可靠、測試劑量控制較嚴(yán)格的一種試驗(yàn)方法。我們多年來在臨床上主要是采用本法來進(jìn)行特異性過敏原檢查的。它可用于食物、吸入物、某些藥物及昆蟲毒液等的測試，其操作方法如下：
一般亦用上臂外側(cè)皮膚為受試區(qū)，令病人側(cè)坐，暴露全臂，以70%酒精消毒皮膚，用結(jié)核菌素注射器及針體長1cm左右的26或27號皮內(nèi)針頭抽取試液。目前在西方已普遍采用一次性注射器，國內(nèi)亦在逐步推廣一次性注射器。為安全計(jì)，不久，國內(nèi)亦將普及推廣。試液的濃度按各自的經(jīng)驗(yàn)不同而有所出入。目前我們采用的吸入性抗原，包括屋塵、羽毛、皮毛、舊棉絮、煙草、真菌、花粉等，采用1∶100濃度。對于食物抗原中不含刺激性的蔬菜、水果、谷物之類，用1∶10濃度。對于魚、肉、蝦、蟹、雞蛋、牛奶及蔥、蒜、姜、辣椒等高蛋白食物或帶刺激性的食物，則采用1∶100濃度。對于個(gè)別效價(jià)較強(qiáng)的抗原，如蒿屬花粉、螨等，我們采用1∶1000或1∶1萬的濃度。還有一些效價(jià)特強(qiáng)的抗原物質(zhì)，如蛔蟲浸液等，我們曾用過1∶10萬的濃度。每個(gè)變態(tài)反應(yīng)臨床工作者，對于自己所用的各種抗原的效價(jià)，必須有一個(gè)大致的了解，以便掌握適當(dāng)?shù)臏y試濃度，防止不良反應(yīng)或意外。
試驗(yàn)按照習(xí)慣的程序，自上而下，由左到右地逐個(gè)進(jìn)行。在每一試區(qū)用皮內(nèi)針頭刺入表皮淺層后，進(jìn)針約2～3mm，推入試液約0.01～0.02ml。每一試區(qū)的間距至少為3cm。皮試后15min即可觀察反應(yīng)結(jié)果，反應(yīng)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)如下：
A.受試者皮膚丘疹直徑在5mm以下，周圍無紅斑形成，或僅有輕微紅斑反應(yīng)者為陰性。
B.皮膚丘疹直徑在5～10mm之間，周圍有輕紅斑反應(yīng)者，為(+)。
C.皮膚丘疹直徑在10～15mm之間，周圍有寬度在10mm以上之紅斑反應(yīng)帶者，為(++)。
D.皮膚丘疹直徑在15mm以上或丘疹不規(guī)則，出現(xiàn)偽足，周圍有寬度在10mm以上之紅斑反應(yīng)帶者，為(+++)。
E.局部反應(yīng)同(+++)，而且同時(shí)出現(xiàn)周身反應(yīng)，如周身皮癢、皮疹、皮膚潮紅、憋氣感、哮喘發(fā)作等癥狀者，為(++++)。
在進(jìn)行皮內(nèi)試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)注意針管針頭的消毒，針管上應(yīng)標(biāo)以所裝抗原之名稱及濃度，以預(yù)防相互混雜。在變態(tài)反應(yīng)專科門診，每天要為大量病人進(jìn)行皮內(nèi)試驗(yàn)，故應(yīng)準(zhǔn)備多個(gè)金屬制的注射器盒，編號消毒后依次裝入盛有各種抗原的注射器。注射用皮內(nèi)針頭亦應(yīng)大量準(zhǔn)備，用過一次即應(yīng)更換。注射器則不必每人更換一次。每次門診后，應(yīng)將皮內(nèi)針頭一一檢查有無倒鉤、變鈍等情況，如發(fā)現(xiàn)有倒鉤或遲鈍則應(yīng)隨時(shí)磨利，以保證下次檢查的順利進(jìn)行。
皮試注射完畢后，在病人等候觀察反應(yīng)的15～20min內(nèi)，應(yīng)隨時(shí)觀察病人有無全身性反應(yīng)出現(xiàn)，如唇麻、掌癢、全身搔癢、皮色潮紅、咳嗽、哮喘、胸悶、脈搏細(xì)速等情況。如有此類情況，應(yīng)立刻讓病人躺下休息，根據(jù)反應(yīng)輕重給予適當(dāng)?shù)拇胧?，輕者可以針刺病人手掌掌心或人中、印堂、十宣等穴。有胸悶咳喘者給以異丙基腎上腺素或沙丁胺醇(舒喘靈)等類藥物吸入。重者應(yīng)注射腎上腺素，吸氧，甚至人工呼吸、靜脈內(nèi)注射腎上腺素等。20余年來，我們在為數(shù)以幾十萬計(jì)的病人進(jìn)行皮內(nèi)試驗(yàn)中，雖亦曾發(fā)生過若干例較重的皮試后反應(yīng)，均因及時(shí)處理而安然恢復(fù)。
近年來我們對皮試后出現(xiàn)全身反應(yīng)的病人進(jìn)行手掌掌心針刺，收到很好的效果。其方法為用1.5寸(1.5寸=3.3cm)的針灸針刺入病人兩側(cè)手掌中心，進(jìn)針約1寸左右，稍加搗捻，留針10min左右。一般于針刺后3～5min情況即見逐漸恢復(fù)。此外異丙基腎上腺素、沙丁胺醇(舒喘靈)、特布他林(喘康速)等氣霧吸入對皮試后出現(xiàn)哮喘發(fā)作的病人亦頗有效。故消毒好的針灸針、異丙基腎上腺素、舒喘靈氣霧劑，以及注射用的腎上腺素、麻黃素(麻黃堿)等亦應(yīng)在門診隨時(shí)準(zhǔn)備著，以防皮試后周身性反應(yīng)的發(fā)生。
皮內(nèi)試驗(yàn)時(shí)還應(yīng)防止局部感染。除了在操作時(shí)嚴(yán)格無菌技術(shù)外，還要隨時(shí)檢查皮試用抗原有無污染。因?yàn)榉磸?fù)用針頭抽吸瓶內(nèi)抗原，日久可帶進(jìn)污染物。故每次抽藥時(shí)應(yīng)注意觀察藥液有無混濁或沉淀產(chǎn)生，平時(shí)抗原應(yīng)經(jīng)常貯藏在4℃左右的冰箱內(nèi)。配好的皮試用抗原，使用1個(gè)月左右后應(yīng)重配更新。
在變態(tài)反應(yīng)診室工作的醫(yī)生、護(hù)士或技術(shù)員之間，應(yīng)密切配合。皮膚試驗(yàn)一般均由護(hù)士或技術(shù)員操作，試驗(yàn)中一旦發(fā)生特殊情況，應(yīng)隨時(shí)報(bào)告醫(yī)生，共同配合采取措施。醫(yī)生在采集病史或檢查中，如發(fā)現(xiàn)病人對某物有強(qiáng)烈過敏反應(yīng)者，亦應(yīng)提醒皮試者，以便皮試時(shí)注意觀察，必要時(shí)可換用較高稀釋度的抗原進(jìn)行皮試，亦可在皮內(nèi)試驗(yàn)前先作貼斑試驗(yàn)或抓傷試驗(yàn)，以策安全。
在皮內(nèi)試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)防止將空氣注入皮內(nèi);一旦注入，局部皮膚即可能出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。由于注入空氣而造成的皮膚假陽性反應(yīng)有時(shí)可呈“濺潑現(xiàn)象”，因?yàn)榭諝庾⑷牒罂煞稚槎鄶?shù)小氣泡，竄向四處皮內(nèi)組織，引起分散成星星點(diǎn)點(diǎn)的皮膚紅斑，這與抗原注入后出現(xiàn)的片狀反應(yīng)不同，經(jīng)仔細(xì)觀察可以與前面敘述的真實(shí)陽性反應(yīng)區(qū)別。進(jìn)行皮內(nèi)試驗(yàn)注射時(shí)應(yīng)避開血管，進(jìn)針后應(yīng)先回抽無血，方能推藥，以防止試液直接進(jìn)入血管，造成強(qiáng)烈反應(yīng)。
一般在全組抗原皮試完成后，應(yīng)在鄰近部位再用生理鹽水或提取抗原之溶媒做一皮內(nèi)對照試驗(yàn)，以排除非特異性刺激造成假陽性反應(yīng)的可能性。同時(shí)還用0.1mg/ml的磷酸組織胺溶液作一陽性對照試驗(yàn)，以排除可能出現(xiàn)的假陰性反應(yīng)。冬季為病人進(jìn)行皮試時(shí)，應(yīng)注意保暖，防止病人受涼感冒。
在變態(tài)反應(yīng)科診室內(nèi)為病人進(jìn)行皮內(nèi)試驗(yàn)時(shí)，每天需用大量結(jié)核菌素注射器，每個(gè)注射器的筒管與筒芯應(yīng)加編號，清洗時(shí)應(yīng)逐個(gè)進(jìn)行，以免筒管與筒芯不能配對而造成漏液或筒芯不能插入筒管等情況。
⑤眼結(jié)膜試驗(yàn)(conjunctival test)：由于眼睛的球結(jié)膜及瞼結(jié)膜上均有豐富而排列整齊的毛細(xì)血管網(wǎng)，眼結(jié)膜的背景又極光亮而潔凈，是一種觀察抗原抗體反應(yīng)的良好場所，而且反應(yīng)又很迅速，所以在某些情況下，可以利用眼結(jié)膜進(jìn)行過敏原特異性試驗(yàn)。其方法為：先用1∶1000的抗原一滴滴入病人右眼，若5min后未出現(xiàn)眼癢、眼紅、流淚、結(jié)膜充血等現(xiàn)象，可再用1∶100抗原滴入1滴，再觀察5min。如仍無反應(yīng)，必要時(shí)可再用1∶10抗原滴入1滴，如仍無反應(yīng)，則屬陰性。如果抗原滴入后出現(xiàn)眼紅、眼癢、流淚、結(jié)膜充血、甚于眼瞼水腫現(xiàn)象，則屬陽性反應(yīng)。可同時(shí)在左眼滴入1滴生理鹽水或抗原提取溶媒作為對照。其陽性反應(yīng)的分級標(biāo)準(zhǔn)為：鞏膜及結(jié)膜輕度充血(+);鞏膜及結(jié)膜明顯充血，眼輕癢(++);鞏膜及結(jié)膜全紅，明顯眼癢及流淚(+++);在(+++)基礎(chǔ)上還出現(xiàn)結(jié)膜出血，眼瞼水腫等(++++)。
這個(gè)方法的優(yōu)點(diǎn)是反應(yīng)快速、現(xiàn)象清楚生動(dòng)，對于某些可疑藥液的過敏，亦可做此試驗(yàn)。但有下列缺點(diǎn)：凡一切帶刺激性的抗原均不宜采用。此法每次只能進(jìn)行一種抗原的測試，如作多種的抗原測試，則不合適。
⑥鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)(nasal mucosa provocation test)：試驗(yàn)可分為兩種，一種是抗原吸入試驗(yàn)(inhalation test)，即將抗原由鼻內(nèi)吸入以激發(fā)過敏性鼻炎的癥狀。近30余年來，我們在臨床上對于一些花粉癥過敏病史典型而皮內(nèi)試驗(yàn)陰性者進(jìn)行過不少這種試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其中有半數(shù)以上的病人可以誘發(fā)不同程度的花粉癥發(fā)作癥狀。操作方法為：將極少量干花粉置入病人鼻腔，數(shù)分鐘之后，病人即出現(xiàn)陣發(fā)性噴嚏、流清水鼻涕、鼻塞、鼻癢等癥狀。檢查可見鼻黏膜蒼白、水腫，分泌物大量增加。有的病人同時(shí)出現(xiàn)哮喘發(fā)作。此時(shí)從病人鼻分泌物或痰液中可以檢到大量嗜酸性細(xì)胞。
這一試驗(yàn)表現(xiàn)生動(dòng)，對病人和醫(yī)生均有很好的說服力。其缺點(diǎn)為每次只能作一種抗原的測試。激發(fā)用抗原的劑量應(yīng)嚴(yán)格控制，以防止強(qiáng)烈反應(yīng)的發(fā)生。我們在進(jìn)行此類試驗(yàn)中，有誘發(fā)哮喘者，但經(jīng)過適當(dāng)?shù)奶幚?，喘息即告平?fù)。另一種是抗原鼻內(nèi)滴入試驗(yàn)(instillation test)。各種吸入性抗原浸液均可經(jīng)鼻內(nèi)滴入，以測試其敏感性。在臨床上，我們亦曾試用過某些花粉浸液鼻內(nèi)滴入激發(fā)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其陽性率遠(yuǎn)不如干花粉吸入激發(fā)者為高。此外亦可用被測抗原浸液滴在1.0cm×1.0cm見方的白色濾紙片上，然后將紙片敷貼在一側(cè)鼻腔的下鼻甲黏膜上進(jìn)行激發(fā)，但其反應(yīng)強(qiáng)度遠(yuǎn)不如干花粉直接激發(fā)明顯。
⑦氣管內(nèi)激發(fā)試驗(yàn)(bronchial provocative test)：與鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)相似，可以采用抗原氣霧吸入激發(fā)，或用抗原浸液氣管內(nèi)滴入激發(fā)。亦有人采用氣霧吸入或氣管內(nèi)滴入組織胺進(jìn)行非特異性激發(fā)試驗(yàn)以測定病人支氣管的反應(yīng)性。但對組織胺或乙酰膽堿吸入或滴入的方法，目前還有爭論。有人認(rèn)為，即使正常人吸入或滴入上列藥劑，亦可誘發(fā)哮喘。正常的誘發(fā)劑量對不同年齡、性別、體重的病人均不一樣。至于抗原的氣管內(nèi)吸入或滴入激發(fā)試驗(yàn)，近年頗受國外的重視，研制出專門的儀器，進(jìn)行精確的定量控制，并結(jié)合肺功能的測定，以判斷病人支氣管對各種特異性抗原的敏感程度。
⑧離子透入試驗(yàn)(iontophoresis test)：利用離子透入裝置，將抗原電離后透入受試病人的皮膚或其他表層組織，以觀察病人的特異反應(yīng)。這種試驗(yàn)的先決條件是抗原必須為可以電離的物質(zhì)，而且先要了解抗原電離后是以陽離子方式還是陰離子方式游離的，以便選擇不同的電極進(jìn)行透入。而且還要求抗原電離后不影響它的抗原效價(jià)。它的優(yōu)點(diǎn)是無痛，但是操作比較繁復(fù)，需要一套特殊的裝備，而且還有較多的環(huán)節(jié)可能影響其結(jié)果，故難以推廣。目前只用于某些實(shí)驗(yàn)性研究。
⑨舌下試驗(yàn)(sublingual test)：因?yàn)樯嘞掠胸S富的血管，黏膜菲薄，若用各種食物、吸入物抗原浸液或可溶性藥物置于舌下，短時(shí)間內(nèi)即可被吸收而產(chǎn)生相應(yīng)的過敏癥狀。其缺點(diǎn)為安全劑量與有效劑量之間的尺度難控制;每次亦只能作一種抗原的試驗(yàn);作食物試驗(yàn)時(shí)病人于受試前24h應(yīng)先停止食用同類食物。舌下試驗(yàn)的陽性反應(yīng)往往不表現(xiàn)在舌下局部而表現(xiàn)在呼吸、消化、循環(huán)等系統(tǒng)。故必須由有經(jīng)驗(yàn)的測試者仔細(xì)觀察方可判明。舌下試驗(yàn)的創(chuàng)始人美國變態(tài)反應(yīng)學(xué)家G.Pfeiffer數(shù)十年來一直在臨床上采用此法為病人進(jìn)行變態(tài)反應(yīng)的特異性診斷。
⑩食物激發(fā)試驗(yàn)(food provocation test)：這種試驗(yàn)適用于有對某種食物過敏歷史而經(jīng)過特異性皮膚試驗(yàn)結(jié)果又與病史不符的病人。為了進(jìn)一步明確病人對該類食物的敏感性情況，可以試用此種試驗(yàn)。其方法為：病人于受試前24h禁止進(jìn)用此類食物，試前當(dāng)天最好空腹或僅進(jìn)少量普通飲食。試驗(yàn)前先為病人測試脈搏、血壓、呼吸及白細(xì)胞計(jì)數(shù)，然后讓病人進(jìn)食可疑食物，食用量可按病情決定。例如：對小麥面過敏者可食用一個(gè)面包或饅頭;對雞蛋過敏者，可一次食用2個(gè)雞蛋;對牛奶過敏者可一次飲用半磅牛奶。然后留病人在院觀察3h左右。其間于進(jìn)食后0.5，1.5，2.5h各測脈搏、呼吸、血壓及白細(xì)胞計(jì)數(shù)一次，觀察有無呼吸、脈搏明顯增快，血壓或白細(xì)胞計(jì)數(shù)下降等情況。同時(shí)觀察病人有無腹痛、惡心、嘔吐、皮疹、皮癢、腹瀉、頭痛、噴嚏、哮喘等過敏癥狀發(fā)生，并一一記錄之。如果進(jìn)食后3h內(nèi)病人出現(xiàn)相應(yīng)的過敏癥狀，并有呼吸脈搏明顯增快，或白細(xì)胞總數(shù)下降與激發(fā)前比相差1000以上者，則為陽性反應(yīng)。這種試驗(yàn)亦稱為白細(xì)胞減少指數(shù)試驗(yàn)。對于此類試驗(yàn)，近年來我們先后已作過數(shù)十例，對有些病人反應(yīng)明顯，但亦有不少病人試驗(yàn)后并無特殊反應(yīng)。受試病人于次日還應(yīng)來院隨診一次，以觀察有無后期反應(yīng)。這種試驗(yàn)的缺點(diǎn)亦在于手續(xù)繁復(fù)。每次門診最多只能作1～2個(gè)病人，而且每個(gè)病人只能作一種食物測試。但如果試驗(yàn)中出現(xiàn)明顯的陽性激發(fā)癥狀，則它在食物過敏特異性診斷中的真實(shí)意義與生動(dòng)性還是不容否認(rèn)的。如條件允許，上列各種特異性激發(fā)試驗(yàn)均應(yīng)將病人收入病房內(nèi)進(jìn)行，以便持續(xù)觀察，并保證安全。
被動(dòng)轉(zhuǎn)移試驗(yàn)(passive transfer test)：亦稱普-科二氏試驗(yàn)(Prausnitz Küstner test，簡稱P-K試驗(yàn))。這是利用過敏病人的特異性循環(huán)抗體在血清中可以被動(dòng)轉(zhuǎn)移的特性而發(fā)展起來的，是人類歷史上第一個(gè)在人體上所做的體外變應(yīng)原特異性診斷的成功范例。適用于不能在自體進(jìn)行特異性皮試的幼嬰、嚴(yán)重剝脫性皮炎患者、躁動(dòng)不安無法接受皮試操作者、嚴(yán)重的人工蕁麻疹患者皮膚呈普遍的假陽性反應(yīng)者、其他嚴(yán)重皮膚病或重癥病人不能提供自身皮試者等。試驗(yàn)前應(yīng)先選定適當(dāng)?shù)闹驹甘茉囌撸话憔刹∪说母改富蛴H屬承擔(dān)。試前應(yīng)為病人作有關(guān)傳染性肝炎或其他可能由血清傳染的疾病的血清學(xué)檢查，證明無上列傳染病方可進(jìn)行此類檢查。試驗(yàn)前24h病人及志愿受試者均不能用腎上腺素、腎上腺皮質(zhì)激素或抗組織胺類藥物。試驗(yàn)時(shí)先從病人身上采血10ml，裝入無菌試管離心或自然立放24h，以分離血清。在無菌操作下取分離得的血清在志愿受試者背部皮內(nèi)按準(zhǔn)備測驗(yàn)的抗原數(shù)目，順序作多點(diǎn)皮內(nèi)注射。每一處注射血清0.1ml，并在注射處用鋼筆畫圈做好標(biāo)記。24～48h后在畫圈的血清轉(zhuǎn)移部位，按皮內(nèi)試驗(yàn)法作各種抗原的特異性試驗(yàn)。試前志愿受試者亦不能大量接觸食用所欲測試的各種吸入物或食物。試驗(yàn)結(jié)果的判定按一般皮內(nèi)試驗(yàn)法標(biāo)準(zhǔn)記錄。最近亦有人報(bào)道利用猴、猩猩等靈長目動(dòng)物作為受試者的。
P-K試驗(yàn)為變態(tài)反應(yīng)病的特異性抗體的客觀存在提供了有力的依據(jù)，對變態(tài)反應(yīng)的理論性研究是一個(gè)很大的貢獻(xiàn)。我們在臨床實(shí)踐中認(rèn)為它亦是有一定應(yīng)用價(jià)值的，例如：患兒陳××，女，5歲，有支氣管喘息，皮內(nèi)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對屋內(nèi)塵土、魚、芝麻有強(qiáng)陽性反應(yīng);繼由患兒父親作為志愿受試者進(jìn)行了被動(dòng)轉(zhuǎn)移試驗(yàn)，結(jié)果與自身皮試的反應(yīng)完全相符。但是另一方面，由于被動(dòng)轉(zhuǎn)移試驗(yàn)手續(xù)繁復(fù)而費(fèi)時(shí)，要求條件嚴(yán)格，有可能傳播傳染性肝炎、梅毒、艾滋病等，如無肯定的適應(yīng)證應(yīng)審慎采用。
菌苗特異性試驗(yàn)(specific bacterial vaccine test)：近年來，我們對一部分久治不愈的支氣管哮喘及過敏性鼻炎或過敏性鼻竇炎患者進(jìn)行呼吸道細(xì)菌性過敏的探索。為病人進(jìn)行自身的呼吸道細(xì)菌培養(yǎng)及菌苗制備，然后用所得菌苗為病人進(jìn)行皮膚試驗(yàn)。一般采用每毫升含5億死菌的菌苗，按1∶1000、1∶100和1∶10加以稀釋，然后分別為病人進(jìn)行皮內(nèi)試驗(yàn)，先于15min時(shí)觀察一次即刻反應(yīng)，然后分別觀察24h及48h的延緩反應(yīng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)病人即刻反應(yīng)均不明顯，24～48h延緩反應(yīng)則個(gè)別有(+)或(++)陽性反應(yīng)者;但極少見有(+++)以上反應(yīng)。一度我們還以卡他球菌、甲類鏈球菌、金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎球菌、流感桿菌、變形桿菌及大腸埃希桿菌等9種從呼吸道過敏病人鼻或咽部取得的菌種制成混合菌苗，作為常規(guī)的皮內(nèi)試驗(yàn)項(xiàng)目，為呼吸道過敏的病人進(jìn)行皮內(nèi)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其陽性率亦不高。但是利用細(xì)菌性抗原進(jìn)行特異性皮膚試驗(yàn)，作為細(xì)菌性傳染病的特異性診斷，歷史已極悠久。臨床上最常用者為結(jié)核菌素試驗(yàn)，作為結(jié)核菌感染的特異性診斷，至今有重要的價(jià)值;它的陽性反應(yīng)程度，可視為一種判斷細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)。
根據(jù)上列各種變態(tài)反應(yīng)的體內(nèi)特異性診斷方法，說明變態(tài)反應(yīng)的特異性診斷已經(jīng)發(fā)展成為一系列很有意義的診斷手段，具有很重要的理論和臨床實(shí)用價(jià)值。但是從另一方面看，體內(nèi)特異性診斷的正確性尚有一定的限制，臨床試驗(yàn)中假陽性和假陰性的結(jié)果還時(shí)有發(fā)生。試驗(yàn)結(jié)果與主觀誘因的符合率還存在著一定的差距。所以，在進(jìn)行特異性皮膚試驗(yàn)做出特異性診斷時(shí)，還必須結(jié)合病史、發(fā)病的時(shí)間、地點(diǎn)、病人工作或職業(yè)特點(diǎn)、客觀體征等，作綜合而全面的分析調(diào)查，方能做出比較正確的結(jié)論。
1.放射診斷 包括胸部透視、攝片、支氣管造影，鼻旁竇X線攝影，胃腸造影等，對某些變態(tài)反應(yīng)病亦有重要的診斷意義。特別對過敏性肺炎、過敏性鼻竇炎的診斷，X線檢查有特殊的重要價(jià)值。此外，X線檢查有助于鑒別其他非變態(tài)反應(yīng)性疾病和排除并發(fā)癥。近代影像診斷包括：B超、CT、磁共振等，必要時(shí)亦應(yīng)用于變態(tài)反應(yīng)病的輔助診斷。
2.藥劑診斷 對于某些變態(tài)反應(yīng)病，在經(jīng)過各種檢查不能確認(rèn)的情況下，亦可以采用某些對變態(tài)反應(yīng)有良效的藥物，如腎上腺素、β2受體興奮藥、各種抗組織胺藥物、各種腎上腺皮質(zhì)激素類藥物等，進(jìn)行試探性治療。如經(jīng)過用藥療效卓著，則可以從側(cè)面引證變態(tài)反應(yīng)病的診斷。但在進(jìn)行這種試探性藥劑診斷時(shí)，必須全面考慮病情，排除所試用藥物對病人的禁忌情況和可能產(chǎn)生的副作用。