小兒幽門螺桿菌感染 的檢查：

尿素酶試驗 直接涂片檢查 幽門螺旋桿菌的直接檢查 幽門螺旋桿菌血清學測試 纖維胃鏡檢查 14C呼氣試驗 免疫印跡技術 幽門螺旋桿菌的免疫學檢測 胃液尿素測定 呼氣試驗

Hp的診斷方法有多種，主要分為兩大類：直接法和間接法。
1.細菌的直接檢查 用培養(yǎng)、PCR、組織學方法直接檢測胃黏膜內的Hp。
(1)培養(yǎng)法：通過胃鏡鉗取胃竇黏膜作Hp培養(yǎng)是最精確的診斷方法，可作為驗證其他診斷性試驗的金標準。此外，還可提供細菌的藥物敏感試驗，指導臨床選用藥物，尤其是治療失敗者或生活在Hp耐藥性很高的國家與地區(qū)。Hp培養(yǎng)法特點是特異性高，但敏感性居中，操作技術難，耗費時間較長，培養(yǎng)需3～6天，即使是有經驗的實驗師操作，培養(yǎng)成功率也僅達75%～95%。影響Hp生長，造成假陰性結果的因素有許多，如培養(yǎng)標本不含Hp;胃鏡檢查時吞咽表面麻醉劑;活檢鉗污染;或最近使用過抗生素或鉍劑，這些均能抑制細菌生長。此外標本接種時間與分離培養(yǎng)基是否新鮮也有關。
最近報道從人的糞便中也可培養(yǎng)出Hp，但需在微氧的環(huán)境下離心，濃縮細菌而獲得，因為目前只能在50%Hp定植患者的糞便中檢出，所以對此非侵襲方法尚需作進一步研究。
(2)組織切片法：另一種Hp的直接檢查法，能提供組織形態(tài)學的信息，因為Hp定居在人胃黏液的黏液下層，上皮細胞表面，正常情況下該部位不存在其他細菌，因此根據(jù)在組織切片上的形態(tài)特點和分布特征 (在胃黏液和胃腔之間存在螺旋桿菌狀物)，即可診斷Hp感染，是較可靠的方法。組織學檢查特點是敏感性高，可同時做病理檢查，并可永久保存資料。染色方法很多，包括HE染色、Gram染色、碳酸復紅染色、W-S(Warthin-Starry)染色、Giemsa(吉姆薩)染色等。革蘭染色，因檢出率低幾乎已不用;標準HE染色能檢出Hp，但也不是可靠的方法，W-S銀染是很好的技術，盡管價格和技術要求高，由于檢測有效，臨床應用較為普遍，吉姆薩染色費用較少，一些作者認為此方法在質量上與W-S銀染相等。
除常規(guī)的組織學檢查外，還有免疫化學和免疫熒光方法，但需使用免疫熒光鏡和免疫抗體，使檢查變得更昂貴，且又不能提供常規(guī)組織學發(fā)現(xiàn)以外的信息，因而不能常規(guī)使用，多用于實驗室研究。
(3)直接涂片染色：用相差顯微鏡直接檢查涂于玻片上的胃黏液中Hp?？捎眠灌こ热旧?、革蘭染色、Giemsa染色。
(4)PCR(聚合酶聯(lián)反應)：PCR是檢測Hp是否存在另一種方法，特點是即能快速檢測到新鮮胃黏液標本中的Hp，也能檢測石蠟包埋的活檢樣本。PCR的引物對所有Hp菌株是特異的，故具有高度特異性。和快速尿素酶、培養(yǎng)法和組織學比較，PCR又具有高度敏感性。但一些隱匿的因素能影響此高度的敏感性和特異性，如內鏡和活檢鉗清洗、消毒不嚴導致DNA污染，使特異性降低，使敏感性降低的因素有細菌在胃黏膜的斑塊狀定植或PCR抑制因素的存在。PCR可用于Hp感染的臨床診斷，流行病學調查，Hp的分子遺傳學研究。
2.細菌的間接檢查 利用細菌的生物特性，特別是Hp水解尿素的能力而產生呼氣試驗，尿素酶試驗。血清學因不能提供細菌當前是否存在的依據(jù)，故不能用于目前感染的診斷，主要用于篩選或流行病學調查。對臨床醫(yī)師來說。根據(jù)醫(yī)院的條件，選擇合適的方法用于病人是重要的，目前主要采用聯(lián)合方法診斷。
(1)快速尿素酶試驗：因Hp是人胃內惟一能夠產生大量尿素酶的細菌，故可通過檢測尿素酶來診斷Hp感染。尿素酶分解胃內的尿素生成氨和二氧化碳，使尿素濃度降低，氨濃度升高?；诖嗽恚寻l(fā)展了多種檢測方法。
胃黏膜活檢組織快速尿素酶試驗為目前臨床應用最廣泛的一種方法，具有簡便、實用快速、靈敏等優(yōu)點，但受細菌數(shù)量影響，活檢組織中Hp數(shù)量很少時，易出現(xiàn)假陰性;在使用鉍劑、氨芐西林，甚至H2受體拮抗藥治療后，尿素酶試驗的敏感性明顯降低，故此方法主要用于最初檢測Hp感染。目前所用的方法有如下兩種。
①pH指示劑法：試劑中含有尿素和pH指示劑(如酚紅pH 6.8時為黃棕色，pH 8.4時為粉紅色)。從胃內取出的標本通常呈酸性(pH<6.0)，一般情況下試劑的顏色不變，如果胃內有Hp感染，當黏膜標本放入試劑中，Hp所產生的尿素酶則分解尿素產生氨，使pH值升高，試劑變?yōu)榉奂t色。
②分析化學法：采用分析化學原理檢測Hp尿素酶的最終產物，由于陽性顯色反應不是取決于試劑中pH改變，可以避免一些影響pH的因素所致的假陰性。福建三強生化有限公司生產的CPUT試劑盒屬于這種方法，可半定量指示Hp感染的程度( 、 、 、 )。
(2)呼氣試驗：用核素標記尿素，口服后測定呼氣中標記的CO2量，能間接反映尿素酶的量，屬非侵入性檢查。呼氣試驗具有快速、可靠、安全、無痛苦的優(yōu)點，適合大規(guī)模流行病學調查，表明目前是否有Hp感染，而不是曾否有過感染，因此優(yōu)于血清學檢查。有研究發(fā)現(xiàn)服用膠態(tài)次枸櫞酸鉍劑2h后，即可見14CO2量明顯降低，因此用于療效觀察是一種較敏感的指標，也是隨訪的一種理想方法。呼氣試驗根據(jù)標記物的不同，分為13C-尿素呼氣試驗(breath test)和14C-尿素呼氣試驗。
(3)13C-尿素呼氣試驗：受試者口服13C-尿素5mg/kg，隨后每10min收集一次呼氣標本，連續(xù)3h。如果胃內有Hp感染，口服的13C-尿素溶液在尿素酶的作用下分解成13CO2，經胃腸道吸收后呼出。收集的氣體標本用質譜儀分析，計算13CO2含量。有Hp感染者在口服試液后20min即出現(xiàn)13CO2升高，在100min內持續(xù)升高，而無Hp感染者無13CO2呼出。13C為穩(wěn)定性核素，無放射性，可反復檢查。但13CO2測定較為復雜，需用質譜儀，費用昂貴，多數(shù)醫(yī)院尚不能開展。
(4)14C-尿素呼氣試驗：為了克服13C-尿素呼氣試驗操作復雜、費用昂貴的缺點，用14C-尿素取代13C-尿素，得到同樣滿意的效果。檢測14C用液體閃爍計數(shù)器即可，因而更為實用。其缺點是14C有一定的放射性，不適合于孕婦及兒童。
影響呼氣試驗精確性因素：假陰性結果最常見原因是用抗生素、鉍劑或奧美拉唑不久后做的呼氣試驗(一般要求在治療結束后至少1個月再進行);其次是尿素從胃排空過快或樣本收集太遲。假陽性結果為體內存在或口腔內存在有尿素酶活性的細菌。
但呼氣試驗僅能提供Hp存在的信息，而不能區(qū)分消化道疾病，無法代替胃鏡檢查，不能作為有上消化道癥狀兒童的最初評價方法。
(5)血清學檢查：Hp的血清學診斷是非侵襲和間接的方法，主要用于流行病學或篩選，不能單純作為Hp感染最初的診斷工具，除非和其他方法聯(lián)合應用。血清學檢查的基礎是Hp具有誘導機體局部和全身產生免疫反應的能力，用細菌凝集、補體結合和ELISA三種方法能檢測到Hp抗體，ELISA由于操作簡單，診斷快速，價格便宜和敏感性高等因素，故臨床應用較多。
ELISA方法有2種：
①定性試驗：以陰或陽性表示，不僅用于血清，也可用于唾液、牙齦分泌物，特別適用兒童，缺點是假陽性率高，故陽性結果常需補充另一個肯定方法。
②定量試驗：由機器測試，結果更精確，還可用于治療后的隨訪檢查。
血清學試驗由于為非侵入性且簡單在兒童中應用受歡迎，是一個理想的篩選試驗，小兒中由于Hp感染比成人少。陽性發(fā)現(xiàn)較成人更有助于診斷，文獻報道小兒中IgG抗體含量與細菌的多少或胃炎組織學嚴重程度之間有一定相關性。但血清學不能作為單一的診斷試驗用。且因Hp根除后抗體下降緩慢，故也不能用于抗菌治療后的即刻隨訪。
血Hp免疫印跡法：Hp-IgG抗體、cagA、vacA蛋白抗體，可用于區(qū)分感染的菌株的類型，但價格昂貴。
Hp診斷檢測方法的比較(表1)。
常規(guī)做胸片X線檢查和B超檢查,除外某些慢性疾病如結核、肝炎。