T4/T8比值概述

CD4+/CD8+細(xì)胞在免疫應(yīng)答過(guò)程中起著十分重要的調(diào)節(jié)作用。臨床上檢測(cè)患者外周血中T淋巴細(xì)胞亞群或TH/TS比值，有助于了解機(jī)體的免疫狀態(tài)和某些疾病的發(fā)病機(jī)制和輔助診斷。 

• 檢查部位 其他
• 科室 檢驗(yàn)科
• 相關(guān)疾病 聯(lián)合免疫缺陷病 自身免疫性溶血性貧血
• 相關(guān)癥狀

T4/T8比值正常值

• 2～3∶1。 

T4/T8比值臨床意義

• (1)降低腫瘤、病毒感染、真菌感染、免疫缺陷癥。
  (2)升高自身免疫性和變態(tài)反應(yīng)性疾病。 

T4/T8比值檢查方法

• (1)直接免疫熒光法：
  ①取肝素抗凝外周血，用淋巴細(xì)胞分層液獲得單個(gè)核細(xì)胞，Hank液配成(1～2)×106細(xì)胞/ml。
  ②取1ml細(xì)胞懸液加入5ml塑料管中，離心2000r/min，2min，棄上清。
  ③加FITC-CD4、FITC-CD8各20μl，對(duì)照管加mIgG-FITC，4℃反應(yīng)30min。
  ④Hank液洗2次，2000r/min，2min。
  ⑤流式細(xì)胞計(jì)分析。
  (2)間接免疫熒光法：
  ①分離PBMC，調(diào)至(1～2)×106細(xì)胞/ml。
  ②取1ml細(xì)胞懸液于5ml塑料管中，離心2000r/min，2min，棄上清。
  ③加抗CD4、CD8單克隆抗體各100μl，對(duì)照管加抗體稀釋液或正常小鼠IgG，4℃反應(yīng)30min。
  ④Hank液洗2次，離心2000r/min，2min，棄上清。
  ⑤各加50μl FITC-IgG，4℃反應(yīng)30min。
  ⑥Hank液洗2次，2000r/min，2min。
  ⑦滴片，熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞計(jì)分析。 

T4/T8比值注意事項(xiàng)

• 同B細(xì)胞檢測(cè)。另外，由于間接免疫熒光技術(shù)所用的羊或兔抗鼠熒光抗體與部分白細(xì)胞表面發(fā)生非特異結(jié)合，以及Fc受體的非特異細(xì)胞反應(yīng)和多克隆熒光抗體的結(jié)合放大效應(yīng)，從而造成非特異陽(yáng)性熒光細(xì)胞增多。而對(duì)FITC直標(biāo)單克隆抗體來(lái)說(shuō)，抗體成分、性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上完全均一，只要不使蛋白質(zhì)-FITC復(fù)合物上帶上過(guò)多的電荷，就不會(huì)產(chǎn)生非特異吸附。目前國(guó)外基本上是用直接免疫熒光法，流式細(xì)胞計(jì)來(lái)分析T細(xì)胞亞群的，由于該儀器價(jià)格昂貴，國(guó)內(nèi)尚未普及應(yīng)用。因而對(duì)一般臨床實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，用免疫熒光顯微鏡也能開(kāi)展這項(xiàng)工作。